Question

【題目】農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長(zhǎng)期使用會(huì)污染土壤。為修復(fù)被污染的土壤，可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細(xì)菌。已知該除草劑(含氮有機(jī)物)在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明。請(qǐng)分析回答：

(1)微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作技術(shù)，該技術(shù)的核心是_______。

(2) 在選育過(guò)程中，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一______的培養(yǎng)基上。通過(guò)比較單菌落周圍__________的大小，可篩選出高效的目的菌。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如右圖顯示的A～E五種菌株中，_______是最理想菌株。

(3) 若想對(duì)初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計(jì)數(shù)，可采用的接種方法是_______。將lmL土壤溶液分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度各在3個(gè)平板上分別接入0.lmL稀釋液，經(jīng)過(guò)適當(dāng)培養(yǎng)后，6個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為59、57、58和2、7、5，空白對(duì)照組的平板上沒(méi)有菌落，則每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為_____________個(gè)。實(shí)際上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過(guò)統(tǒng)計(jì)所得的這一數(shù)值要大，因?yàn)?/span>______________________。

(4) 科研人員用放射線處理該細(xì)菌，獲得突變株A和B，然后對(duì)突變株A和B進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下表所示：

接種的菌種	一般培養(yǎng)基	實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果
A	不生長(zhǎng)	添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長(zhǎng)
B	不生長(zhǎng)	添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長(zhǎng)
A＋B	能生長(zhǎng)	不添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲、乙，能生長(zhǎng)

請(qǐng)分析突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的最可能原因。___________________________________________。

Answer 1

【答案】 防止雜菌污染（無(wú)菌操作） 氮源 透明圈 E 稀釋涂布平板法 5.8×106 統(tǒng)計(jì)結(jié)果是用菌落數(shù)來(lái)表示的，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 突變株A生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B可以提供；突變株B生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A可以提供

【解析】試題分析：本題綜合考查學(xué)生對(duì)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、微生物的分離與鑒定等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。解答本題需熟記并理解相應(yīng)的基礎(chǔ)知識(shí)并形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問(wèn)題情境，從題意和圖表中提取有效信息進(jìn)行相關(guān)問(wèn)題的解答。

(1) 微生物接種技術(shù)的核心是防止雜菌污染（無(wú)菌操作）。

(2) 已知該除草劑為含氮有機(jī)物，在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明；降解該除草劑的細(xì)菌能分解培養(yǎng)基中的該除草劑，使培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈。可見(jiàn)，在選育能降解該除草劑的細(xì)菌的過(guò)程中，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上。通過(guò)比較單菌落周圍透明圈的大小，可篩選出高效的目的菌。實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖顯示的A～E五種菌株中，E菌落周圍的透明圈最大，因此E是最理想菌株。

(3) 對(duì)初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計(jì)數(shù)，可采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此應(yīng)選擇稀釋度為10倍的、分別接入0.lmL稀釋液的3個(gè)平板上菌落數(shù)（分別為59、57、58）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，則每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為[(59＋57＋58)÷3]×10 ÷(0.1×10-3)＝5.8×106個(gè)。由于統(tǒng)計(jì)結(jié)果是用菌落數(shù)來(lái)表示的，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以實(shí)際上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過(guò)統(tǒng)計(jì)所得的這一數(shù)值要大。

(4)分析表中信息可知：突變株A生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，據(jù)此可推知，突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的最可能原因是：突變株A生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B可以提供；突變株B生長(zhǎng)需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A可以提供。