Question

【題目】已知微生物A可以產生油脂，微生物B可以產生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產。請回答下列問題。

（1）微生物A產生的油脂不易揮發(fā)，可選用____________（填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”）從菌體中提取。

（2）為了從自然界中獲得能產生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應選用以______________為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。

（3）若要測定培養(yǎng)液中微生物B的活菌數(shù)，一般選用___________法進行計數(shù)。

（4）為了實現(xiàn)酶的回收利用，常采用固定化酶的技術。固定化酶一般不采用_________方法，原因是_______________________________。

（5）生物體內絕大多數(shù)酶的化學本質是蛋白質，在用凝膠色譜柱分離蛋白質時，先洗脫出來的是相對分子質量大的蛋白質，原因是_____________________________。

Answer 1

【答案】萃取法??? 脂肪??? 選擇??? 稀釋涂布平板法??? 物理吸附法或化學結合??? 酶分子太小，容易從包埋材料中漏出??? 相對分子質量較大的蛋白質無法進入凝膠內部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快???

【解析】

1、植物有效成分的提取可用蒸餾法、壓榨法或萃取法，因為油脂不揮發(fā)，所以不適合采用蒸餾法提取，應用壓榨法或萃取法提取。

2、凝膠色譜法的原理：凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質量的大小來分離蛋白質的有效方法，相對分子質量小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質量不同的蛋白質得以分離。

（1）因為油脂不揮發(fā)，所以不適合采用蒸餾法提取，可選用壓榨法或萃取法提取。

（2）篩選產脂肪酶的微生物B時，應該使用只有目的菌能夠生存的，其他微生物不能生存的選擇培養(yǎng)基，故培養(yǎng)基中應該添加脂肪作為唯一碳源以抑制不能以脂肪做碳源的微生物的生長。

（3）若要測定培養(yǎng)液中微生物B的活菌數(shù)量，常用稀釋涂布平板法進行計數(shù)。

（4）由于酶分子太小，容易從包埋材料中漏出，所以固定化酶常用物理吸附法或化學結合法，而不用包埋法。

（5）根據(jù)上述分析可知，相對分子質量較大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道，路程短，移動的速度快，所以最先洗脫出來的是相對分子質量大的蛋白質。