Question

18．淀粉酶是用途最廣、產(chǎn)量最大的酶制劑之一，廣泛用于印染、釀造和醫(yī)藥行業(yè)．請回答：
（1）配制篩選能分泌淀粉酶的微生物的培養(yǎng)基時，應以淀粉為唯一碳源．獲得的菌種長期保存的方法是甘油管藏．
（2）從面粉加工廠附近的土壤中，取5g土壤倒入裝有45mL蒸餾水并帶有玻璃珠的錐形瓶中振蕩，制成土壤懸液．將土壤懸液稀釋10⁴倍后，用稀釋涂布平板法分別將0.1mL的菌液接種到3個平板上，培養(yǎng)一段時間，3個平板中的菌落數(shù)分別為53個、60個、73個，則土壤懸液中分泌淀粉酶的微生物有6.2×10⁶個/mL．將接種后的平板置于恒溫培養(yǎng)箱中倒置（填“正置”或“倒置”）培養(yǎng)．
（3）在培養(yǎng)基中加入碘化鉀后，出現(xiàn)透明圈的菌落能分泌淀粉酶，原理是淀粉遇碘化鉀變藍，淀粉酶分解淀粉后出現(xiàn)透明圈．一般情況下，透明圈直徑（D）和菌落直徑（d）的比值（$\frac{D}gcq1ety$）反映了淀粉酶的活性，它們的關系是D/d值越大，淀粉酶活性越高．
（4）篩選獲得的微生物，經(jīng)鑒定是芽孢桿菌，芽孢桿菌除產(chǎn)生活性較強的淀粉酶外，還產(chǎn)生活性較強的蛋白酶和脂肪酶，因此，在動物飼料中添加芽孢桿菌或其代謝產(chǎn)物可提高動物對營養(yǎng)物質消化吸收的效率．

Answer 1

分析 1、菌種保存

	臨時保存法	甘油管藏法
適用對象	頻繁使用的菌種	長期保存的菌種
培養(yǎng)及類型	固體斜面培養(yǎng)基	液體培養(yǎng)基
溫度	4℃	-20℃
方法	菌落長成后于冰箱中保存，每3～6個月將菌種從舊的培養(yǎng)基轉移到新鮮培養(yǎng)基上	將培養(yǎng)的菌液與等體積滅菌后的甘油混合均勻后于冷凍箱內保存

2、平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染．

解答 解：（1）根據(jù)選擇培養(yǎng)基的配置原則，配制篩選能分泌淀粉酶的微生物的培養(yǎng)基時，應以淀粉為唯一碳源．獲得的菌種長期保存的方法是甘油管藏．
（2）對微生物計數(shù)一般采用稀釋涂布平板法．根據(jù)題干中所給數(shù)據(jù)，土壤懸液中分泌淀粉酶的微生物有=（53+60+73）÷3÷0.1×10⁴=6.2×10⁶個/mL．為了防止培養(yǎng)基中的冷凝水污染培養(yǎng)基，需要將接種后的平板置于恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)．
（3）淀粉遇碘化鉀變藍，淀粉酶分解淀粉后出現(xiàn)透明圈，因此在培養(yǎng)基中加入碘化鉀后，出現(xiàn)透明圈的菌落能分泌淀粉酶．一般情況下，透明圈直徑（D）和菌落直徑（d）的比值（$\frac{D}vb9de6c$）反映了淀粉酶的活性，D/d值越大，淀粉酶活性越高．
（4）分析題意可知，芽孢桿菌除產(chǎn)生活性較強的淀粉酶外，還產(chǎn)生活性較強的蛋白酶和脂肪酶，因此，在動物飼料中添加芽孢桿菌或其代謝產(chǎn)物可提高動物對營養(yǎng)物質消化吸收的效率．
故答案為：
（1）淀粉       甘油管藏
（2）稀釋涂布平板      6.2×10⁶   倒置
（3）淀粉遇碘化鉀變藍，淀粉酶分解淀粉后出現(xiàn)透明圈    D/d值越大，淀粉酶活性越高
（4）對營養(yǎng)物質消化吸收

點評 本題考查了微生物的分離和培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠掌握培養(yǎng)基配制的原則，掌握菌種保存的方法，掌握微生物分離和純化的方法，再結合所學知識準確答題．