Question

【題目】研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，表達(dá)異常會(huì)導(dǎo)致它表達(dá)的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過(guò)量存在�？�H蛋白單克降抗體能抑制過(guò)量表達(dá)H蛋白的乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，目前已成為有效的生物治療手段�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）H蛋白是一種跨膜蛋白，結(jié)構(gòu)如上圖所示。制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原），應(yīng)構(gòu)建________（填“胞外”“跨膜”或“胞內(nèi)”）區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純。

（2）將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，取該小鼠的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，將融合細(xì)胞在特定的_______培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選，一段時(shí)間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，這種雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是_____________________________________________________。

（3）上述雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行_______培養(yǎng)和_________檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。

（4）治療乳腺癌時(shí)，將該單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，殺死癌細(xì)胞。這種治療方案的優(yōu)點(diǎn)是________________________________________________________________。

（5）細(xì)胞融合技術(shù)還可用于生物育種，能突破_______________________________________________。

Answer 1

【答案】胞外 選擇 既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體 克隆化 抗體 既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量，療效高、毒副作用少 有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能

【解析】

單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。

誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動(dòng)）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。

（1）由于抗體主要存在于細(xì)胞外液中，因此根據(jù)H蛋白的結(jié)構(gòu)圖可知，若用H蛋白制備抗原需要利用胞外區(qū)基因，由制備獲得的抗體作用于該抗原的胞外區(qū)。

（2）將融合細(xì)胞接種在選擇培養(yǎng)基中，從中選出雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是：既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。

（3）為獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，并多次篩選。

（4）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)，靈敏度高，既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量，療效高、毒副作用少。

（5）細(xì)胞融合技術(shù)可以將不同的物種的體細(xì)胞進(jìn)行融合產(chǎn)生新的個(gè)體，所以突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。