回答下列有關(guān)生物技術(shù)問(wèn)題：
（1）繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后，膀胱生物反應(yīng)器的研究也取得了一定進(jìn)展．最近，科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中．請(qǐng)回答：
①進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí)通常將外源基因轉(zhuǎn)入受精卵中，原因是
 

②如果將外源基因?qū)胄∈笫芫眩瑒t外源基因可能隨機(jī)插入到小鼠受精卵DNA中．這種受精卵有的可發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小鼠，有的卻死亡．請(qǐng)分析因外源基因插入導(dǎo)致受精卵死亡的最可能原因
 
．
③通常采用
 
技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠基因組．
④在研制膀胱生物反應(yīng)器時(shí)應(yīng)使外源基因在小鼠
 
細(xì)胞中特異表達(dá)．
（2）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行
 
（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和
 
；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能
 
．
（3）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染．對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是
 
．
考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),微生物的分離和培養(yǎng)
專題：
分析：1、基因工程的四個(gè)基本操作步驟是：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)和鑒定，其核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．
2、轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器是指利用轉(zhuǎn)基因活體動(dòng)物的某種能夠高效表達(dá)外源基因的器官或組織來(lái)進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)活性功能蛋白的技術(shù)．該技術(shù)的第一步就是導(dǎo)入外源基因，對(duì)于動(dòng)物細(xì)胞來(lái)說(shuō)，常采用的方法是顯微注射法．
3、無(wú)菌技術(shù)包括消毒和滅菌：
（1）消毒指用比較溫和的物理或化學(xué)方法清除或殺滅除芽胞外的所有病原微生物，使其數(shù)量減少達(dá)到無(wú)害化．常用消毒方法：煮沸消毒法、紫外線照射、巴氏消毒法和化學(xué)藥劑消毒．
（2）滅菌指用強(qiáng)烈的物理或化學(xué)方法殺滅所有微生物，包括致病的和非致病的，以及細(xì)菌的芽胞．常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
解答： 解：（1）①由于受精卵的全能性最高，所以進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí)通常將外源基因轉(zhuǎn)入受精卵中．
②當(dāng)外源基因的插入使受精卵內(nèi)生命活動(dòng)必需的某些基因不能正常表達(dá)時(shí)就會(huì)導(dǎo)致受精卵死亡．
③檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠基因組通常采用DNA分子雜交技術(shù)．
④制作膀胱生物反應(yīng)器時(shí)，需要在目的基因前加入膀胱細(xì)胞中特異性表達(dá)的啟動(dòng)子，使外源基因在小鼠膀胱細(xì)胞中特異表達(dá)．
（2）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和 消毒；由于紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)，因此靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅．
（3）檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染的方法是：將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生．
故答案為：
（1）①受精卵全能性最高  
②外源基因的插入使受精卵內(nèi)生命活動(dòng)必需的某些基因不能正常表達(dá)  
③DNA分子雜交    
④膀胱
（2）滅菌  消毒  損傷DNA的結(jié)構(gòu)
（3）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生
點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程、微生物的培養(yǎng)和分離等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、工具及操作過(guò)程，掌握乳腺生物反應(yīng)器的制備過(guò)程，并能進(jìn)行遷移應(yīng)用；識(shí)記無(wú)菌技術(shù)，能對(duì)消毒和滅菌進(jìn)行比較，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題即可．
練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

白菜（2n=20）和甘藍(lán)（2n=18）在正常情況下，無(wú)法產(chǎn)生可育后代，如圖表示利用細(xì)胞工程培育雜種植株白菜甘藍(lán)的示意圖，根據(jù)所學(xué)知識(shí)，回答下列問(wèn)題

（1）由白菜體細(xì)胞獲得A的過(guò)程中，一般會(huì)用到
 
．
（2）誘導(dǎo)A、B融合為C的過(guò)程中常用的誘導(dǎo)劑為
 
，D→E過(guò)程表示
 
，此過(guò)程植物的代謝類型為
 
，E→F過(guò)程中，生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素低時(shí)，可誘導(dǎo)
 
形成，此過(guò)程
 
（需要/不需要）光照．
（3）經(jīng)過(guò)體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的白菜甘藍(lán)為
 
倍體植株，
 
（可/不可）育．此方法與傳統(tǒng)的雜交育種相比，優(yōu)點(diǎn)在于
 
．
（4）經(jīng)誘導(dǎo)形成的雜交細(xì)胞除了白菜甘藍(lán)雜交細(xì)胞外，還有白菜細(xì)胞自身融合細(xì)胞，甘藍(lán)細(xì)胞自身融合細(xì)胞，以及未融合的白菜和甘藍(lán)細(xì)胞．所以，我們要經(jīng)過(guò)篩選，才能選出合適的細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)．請(qǐng)根據(jù)給出的材料用具和步驟完成下列細(xì)胞篩選過(guò)程．
材料用具：融合后的待檢測(cè)細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)液、克隆化培養(yǎng)裝置、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、改良苯酚品紅染液、體積分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸溶液等．
第一步：首先對(duì)融合后的待檢測(cè)細(xì)胞分別進(jìn)行克隆化培養(yǎng)．
第二步：
 
．
第三步：
 
．
第四步：
 
．
如果未找到符合條件的細(xì)胞，則說(shuō)明細(xì)胞融合失敗，需要重新進(jìn)行誘導(dǎo)融合．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

油菜的株高由等位基因G和g決定，GG為高桿，Gg為中桿，gg為矮桿．B基因是另一種植物的高桿基因，B 基因與G基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高與這兩個(gè)基因的數(shù)量正相關(guān)．下圖是培育轉(zhuǎn)基因油菜的操作流程．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）步驟①中用到的工具酶是
 
，可用含
 
的培養(yǎng)基來(lái)篩選含有目的基因的油菜受體細(xì)胞．培育轉(zhuǎn)基因油菜主要運(yùn)用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)和
 
技術(shù)．
（2）若將一個(gè) B 基因連接到了矮桿油菜的染色體上并在植株中得到成功表達(dá)，且B基因與g基因位于非同源染色體上，這樣的轉(zhuǎn)基因油菜表現(xiàn)為
 
．寫(xiě)出該轉(zhuǎn)基因油菜自交產(chǎn)生子一代的遺傳圖解（無(wú)目的基因表示為 b）．
（3）若將一個(gè)B基因連接到了中桿油菜的染色體上并在植株中得到成功表達(dá)，培育了甲～丁四種轉(zhuǎn)基因油菜（如圖）．

①與甲的株高相同的是
 
．四種轉(zhuǎn)基因油菜分別自交，在不考慮交叉互換的前提下，子代有3種表現(xiàn)型的是
 
．
②另有一種轉(zhuǎn)基因油菜自交子代也有3種表現(xiàn)型，請(qǐng)?jiān)趫D中的染色體上標(biāo)出B基因的位置．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

某種陰生植物的根莖可作中藥，有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值．如表為不同遮光處理對(duì)其光合作用影響的結(jié)果．請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題．
遮光比例（%） 葉綠素a/b 葉綠素含量（mg/g） 凈光合速率（μmol?m-2?s-1） 植株干重（g）
0 4.8 2.1 8.0 7.5
10 5.3 2.3 9.6 9.9
30 5.2 2.4 8.9 9.2
50 4.4 2.6 5.2 7.2
70 4.1 2.9 2.7 4.8
90 3.3 3.0 0 3.2
（1）適當(dāng)遮光處理，葉綠素含量會(huì)增加，葉片對(duì)
 
光的吸收能力顯著增強(qiáng)．
（2）遮光比例為90%時(shí)，植物葉肉細(xì)胞中產(chǎn)生[H]的結(jié)構(gòu)有
 
，此時(shí)，對(duì)植物體內(nèi)所有能進(jìn)行光合作用的細(xì)胞來(lái)說(shuō)，葉綠體消耗的CO2量
 
（填“大于”、“等于”或“小于”）細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的CO2量．
（3）遮光比例為0時(shí)的植株干重小于遮光比例為10%時(shí)，可能是由于
 
，導(dǎo)致暗反應(yīng)減弱．
（4）葉綠素a/b的值
 
（填“能”或“不能”）作為該植物利用光能的判斷指標(biāo)，理由是
 
 
（忽略遮光處理對(duì)細(xì)胞呼吸的影響）．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

很久以前科學(xué)家在土壤中發(fā)現(xiàn)了某種細(xì)菌能制造對(duì)昆蟲(chóng)有毒的蛋白質(zhì)，當(dāng)時(shí)許多人就想把編碼這一蛋白質(zhì)的基因（抗蟲(chóng)基因）轉(zhuǎn)移到農(nóng)作物中，以降低昆蟲(chóng)對(duì)農(nóng)作物造成的危害．20世紀(jì)90年代，美國(guó)科學(xué)家采用基因工程技術(shù)首次培育出抗蟲(chóng)玉米新品種．如圖為這一轉(zhuǎn)基因玉米的主要培育過(guò)程．
（1）獲得特定目的基因的途徑除了從該細(xì)菌中直接分離抗蟲(chóng)基因外，還可以
 
．將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時(shí)必須用
 
酶和
 
酶．在基因工程中，常用的運(yùn)載體有
 
等，而作為運(yùn)載體必須具備相應(yīng)的條件，例如，應(yīng)具
 
以便進(jìn)行篩選．
（2）由轉(zhuǎn)基因玉米細(xì)胞經(jīng)過(guò)
 
形成愈傷組織，而愈傷組織的形成應(yīng)調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)素和
 
激素的比例為
 
（=1或＞1或＜1），然后再經(jīng)過(guò)
 
發(fā)育成胚狀體和試管苗．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

將小球藻細(xì)胞打碎，離心獲得可以進(jìn)行光合作用的離體葉綠體，進(jìn)行如圖所示的實(shí)驗(yàn)．請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：

（1）實(shí)驗(yàn)A中離體的葉綠體能合成糖類，碳酸氫鈉所起的作用是
 
．若要使該實(shí)驗(yàn)中沒(méi)有糖類產(chǎn)生，燒杯中的液體應(yīng)該為
 
．
（2）若要是實(shí)驗(yàn)B中離體葉綠體內(nèi)的糖類合成速度明顯加快，在光照和CO2條件不變且適宜的情況下，可考慮采用的措施是
 
．
（3）若要是實(shí)驗(yàn)C中離體葉綠體產(chǎn)生糖類，錐形瓶?jī)?nèi)至少應(yīng)加入
 
和
 
．
（4）實(shí)驗(yàn)的因變量應(yīng)該可以檢測(cè)或者可觀察，該實(shí)驗(yàn)的因變量可通過(guò)觀察
 
來(lái)證明．
（5）卡爾文給小球藻懸浮液通入14CO2光照一定時(shí)間（從1秒到數(shù)分鐘）后殺死小球藻，同時(shí)提取產(chǎn)物并分析．實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，僅僅30秒的時(shí)間，二氧化碳已經(jīng)轉(zhuǎn)化為許多種類的化合物．想要探究CO2轉(zhuǎn)化成的第一個(gè)產(chǎn)物是什么，可能的實(shí)驗(yàn)思路
 
．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

下面是將乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg導(dǎo)入巴斯德畢赤酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗的過(guò)程及有關(guān)資料，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題．
資料1：巴斯德畢赤酵母菌是一種甲基營(yíng)養(yǎng)型酵母菌，能將甲醇作為其唯一碳源，此時(shí)AOX1基因受到誘導(dǎo)而表達(dá)[5′AOX1和3′AOX1（TT）分別是基因AOX1的啟動(dòng)子和終止子]．
資料2：巴斯德畢赤酵母菌體內(nèi)無(wú)天然質(zhì)粒，所以科學(xué)家改造出了圖1所示的pPIC9K質(zhì)粒用作載體，其與目的基因形成的重組質(zhì)粒經(jīng)酶切后可以與酵母菌染色體發(fā)生同源重組，將目的基因整合于染色體中以實(shí)現(xiàn)表達(dá)．

（1）如果要將HBsAg基因和pPIC9K質(zhì)粒重組，應(yīng)該在HBsAg基因兩側(cè)的A和B位置接上
 
、
 
限制酶識(shí)別序列，這樣設(shè)計(jì)的優(yōu)點(diǎn)是避免質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化．
（2）酶切獲取HBsAg基因后，需用
 
將其連接到pPIC9K質(zhì)粒上，形成重組質(zhì)粒，并將其導(dǎo)入大腸桿菌以獲取
 
．
（3）步驟3中應(yīng)選用限制酶
 
來(lái)切割重組質(zhì)粒獲得重組DNA，然后將其導(dǎo)入巴斯德畢赤酵母菌細(xì)胞．
（4）為了確認(rèn)巴斯德畢赤酵母菌轉(zhuǎn)化是否成功，在培養(yǎng)基中應(yīng)該加入卡拉霉素以便篩選，轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞中是否含有HBsAg基因，可以用
 
方法進(jìn)行檢測(cè)．
（5）轉(zhuǎn)化的酵母菌在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，需要向其中加入
 
以維持其生活，同時(shí)誘導(dǎo)HBsAg基因表達(dá)．
（6）與大腸桿菌等細(xì)菌相比，用巴斯德畢赤酵母菌細(xì)胞作為基因工程的受體細(xì)胞，其優(yōu)點(diǎn)是在蛋白質(zhì)合成后，細(xì)胞可以對(duì)其進(jìn)行
 
并分泌到細(xì)胞外，便于提�。�

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

關(guān)于生物工程應(yīng)用實(shí)例中，以下說(shuō)法錯(cuò)誤的是（　�。�
A、DNA連接酶能將具有末端堿基互補(bǔ)的2個(gè)DNA片段連接在一起
B、將目的基因?qū)肴~綠體DNA中，可以避免因花粉傳播而造成的基因污染
C、細(xì)胞克隆首先須保證分離出來(lái)的細(xì)胞是一個(gè)或多個(gè)分離的細(xì)胞
D、去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞，須用不同的酶處理

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

細(xì)胞的各種膜結(jié)構(gòu)間相互聯(lián)系和轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象稱為膜流，關(guān)于“膜流”的敘述正確的是（　　）
A、神經(jīng)遞質(zhì)的釋放、質(zhì)壁分離和吞噬細(xì)胞攝取抗原都體現(xiàn)了膜流
B、大腸桿菌和酵母菌均能發(fā)生膜流現(xiàn)象
C、膜流的方向只能是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→高爾基體→細(xì)胞膜
D、膜流可參與細(xì)胞不同結(jié)構(gòu)間或細(xì)胞內(nèi)外的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)

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