Question

【題目】桑椹釀酒使用的多為葡萄酒酵母菌。現(xiàn)科研人員從桑園中分離出發(fā)酵性能優(yōu)良的專用桑樵酒酵母菌E44，并用葡萄酒酵母菌（CK）做對照，對其相關(guān)性能進行測定。分析回答下列問題：

（1）分離E44菌株的培養(yǎng)基一般需用______________滅菌，常用的分離方法是平板劃線法和______________。研究發(fā)現(xiàn)，釀酒酵母菌不能以賴氨酸作為氮源，因此可將分離獲得的酵母菌接種在____________________________的培養(yǎng)基上進行鑒定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌株不能生長。

（2）普遍認為酵母菌的發(fā)酵能力與菌株對酒精的耐受性有關(guān)。為此，科研人員對E44菌株和CK菌株在不同酒精濃度下的死亡率進行了測定，由實驗結(jié)果判斷E44菌株的酒精耐受性更高，該結(jié)果的檢測過程中先用次甲基藍染色，再借助顯微鏡運用______________法計數(shù)后，計算出各菌株的死亡率。次甲基藍可將死細胞染成藍色，而活細胞不著色，原因是____________________________。

（3）為進一步確定E44菌株的發(fā)酵性能，科研人員分別測定并繪制了E44菌株和CK菌株的發(fā)酵性能曲線（如下圖）。由圖可知，第1d酵母菌降糖速率緩慢，酒精度增長較慢的原因是______________________。從第2d開始，糖度迅速下降，酒精度也較快增長的原因是____________________________。通過對比發(fā)現(xiàn)，E44菌株比CK菌株起酵快，發(fā)酵平穩(wěn)，是優(yōu)良的桑棋酒釀酒酵母菌種。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌法 稀釋涂布平板法 以賴氨酸為唯一氮源 血細胞計數(shù)板（或顯微鏡直接計數(shù)） 細胞死亡，細胞膜不能控制物質(zhì)進出（或失去選擇透過性） 酵母正處于增殖階段，以有氧呼吸為主，產(chǎn)生酒精較少 酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生大量酒精

【解析】

分析題圖可知，第一天酵母菌降糖緩慢，酒精度增長較慢，說明此時酵母菌正處于大量增殖階段，以有氧呼吸為主，產(chǎn)生酒精較少。從第二天開始糖度迅速下降，酒精度也較快增長，進入發(fā)酵階段，進行無氧呼吸，產(chǎn)生大量酒精。第五天之后糖度和酒精度趨緩，進入后發(fā)酵階段。

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般需要用高壓蒸汽滅菌法滅菌；常用的分離方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；釀酒酵母不能以賴氨酸作為氮源，因此，可以將分離獲得的酵母菌接種在以賴氨酸為唯一氮源的培養(yǎng)基上進行鑒定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)釀酒酵母不能生長；

（2）統(tǒng)計細胞數(shù)量用血細胞計數(shù)板；活細胞的細胞膜具有選擇透過性，用次甲基藍不能對活細胞染色，而能使死細胞染成藍色；

（3）從圖中可以看出，第1 d酵母菌降糖緩慢，酒精度增長較慢，說明此時酵母菌正處于大量增殖階段，以有氧呼吸為主，產(chǎn)生酒精較少；從第2 d開始糖度迅速下降，酒精度也較快增長，進入發(fā)酵階段，進行無氧呼吸，產(chǎn)生大量酒精。