【題目】科學家利用土壤農(nóng)桿菌把編碼霍亂毒素的無毒性β鏈的基因轉(zhuǎn)移到苜蓿細胞,再將其培養(yǎng)成幼苗。動物食用這種苜蓿苗后,霍亂毒素β鏈很快被喉、腸胃等部位的分泌性粘液細胞吸收,從而刺激特異性抗體的大量產(chǎn)生,使機體獲得對霍亂的免疫。其具體過程如下:

⑴從高效表達霍亂毒素β鏈的生物體中提取mRNA,通過____獲得____用于PCR擴增,可得到大量含有霍亂毒素β鏈基因的DNA片段。PCR時需設計一對與霍亂毒素β鏈基因兩端序列互補配對的引物(引物1和引物2),為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒,在引物中需要增加適當?shù)?/span>____位點。設計引物時需要避免引物之間____而造成引物自連。

⑵將目的基因插入到土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的____上,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化,目的基因就能整合到苜蓿細胞的染色體DNA上,構(gòu)建基因表達載體的目的是____

⑶Ti質(zhì)粒上有一個tms片段能促進生長素的大量合成,在對Ti質(zhì)粒改造時應____,以防苜蓿體內(nèi)生長素濃度過高而抑制苜蓿生長。

⑷欲檢測苜蓿細胞內(nèi)是否具有霍亂毒素β鏈,在分子水平上檢測的方法是從轉(zhuǎn)基因的苜蓿細胞中提取蛋白質(zhì),進行____

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 cDNA 限制性核酸內(nèi)切酶酶切 堿基互補配對 T-DNA 使目的基因在宿主細胞中穩(wěn)定地復制并表達 將該片段去除 抗原﹣抗體雜交

【解析】

本題以“圖文結(jié)合”為情境,考查學生對基因工程的基本操作程序等相關知識的識記和理解能力,以及識圖分析能力。

(1) 采用逆轉(zhuǎn)錄法獲取霍亂毒素β鏈基因(目的基因)并利用PCR技術對其進行擴增時,首先從高效表達霍亂毒素β鏈的生物體中提取mRNA,通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,其次是將cDNA進行PCR擴增。在進行PCR擴增時需要設計一對與霍亂毒素β鏈基因兩端序列互補配對的引物。因霍亂毒素β鏈基因兩端插入了引物,因此在構(gòu)建重組質(zhì)粒時,要在引物中增加適當?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶的酶切位點,以保證目的基因(霍亂毒素β鏈基因)完整地插入到重組質(zhì)粒中。設計引物時,需要避免引物之間堿基互補配對,否則會造成引物自連,導致目的基因無法插入到重組質(zhì)粒中。

(2) 利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胲俎<毎脑|(zhì)體中,需將目的基因插入到土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA上。構(gòu)建基因表達載體的目的是使目的基因在宿主細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。

(3) 由于Ti質(zhì)粒上有一個tms片段能促進生長素的大量合成,而生長素濃度過高會抑制苜蓿生長,所以在對Ti質(zhì)粒改造時應將該片段去除,以防止苜蓿體內(nèi)生長素濃度過高而抑制苜蓿生長。

(4) 欲檢測苜蓿細胞內(nèi)是否具有霍亂毒素β鏈,即“檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)”,在分子水平上應采用抗原﹣抗體雜交技術從轉(zhuǎn)基因的苜蓿細胞中提取蛋白質(zhì),進行檢測。

練習冊系列答案
相關習題

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【題目】下列關于染色體的敘述,正確的是

A.四分體時期,染色體的交叉互換可導致基因重組

B.染色體的某一片段移接到另一條非同源染色體上則導致基因突變

C.體細胞含有兩個染色體組的生物個體一定是二倍體

D.一個染色體組中一定含有該中生物全部的遺傳信息

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【題目】圖示是測定發(fā)芽種子的呼吸類型所用裝置(假設呼吸底物只有葡萄糖且無氧呼吸產(chǎn)生酒精,并且不考慮外界條件的影響),下列有關說法錯誤的是( 。

甲裝置

乙裝置

結(jié)論

A

液滴左移

液滴不動

只進行有氧呼吸

B

液滴不動

液滴右移

只進行無氧呼吸

C

液滴右移

液滴左移

只進行有氧呼吸

D

液滴左移

液滴右移

既進行有氧呼吸又進行無氧呼吸

A. A B. B C. C D. D

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【題目】某科研人員將綠色的小麥葉片放在溫度適宜的密閉容器內(nèi),在不同的光照條件下,測定該容器內(nèi)氧氣量的變化,實驗結(jié)果如圖所示。分析回答:

(1)在0~5min內(nèi),該容器內(nèi)減少的氧氣在_________場所形成水,此階段葉肉細胞中CO2的產(chǎn)生場所為______________。(答具體場所)

(2)B點以后,葉肉細胞的光合作用速率________(填大于”、“小于等于)呼吸作用速率,此時,細胞中生成ATP最多的場所是________

A線粒體 B葉綠體 C細胞質(zhì)基質(zhì) D細胞核

(3)若向密閉容器中加入18O標記的O2,可在該綠色植物葉肉細胞中檢測到放射性的淀粉。請寫出18O最短的轉(zhuǎn)移途徑______________________________(用文字和箭頭表示)。

(4)在5~15min內(nèi),該容器內(nèi)氧氣量增加的速率逐漸減小,這是因為________。如果小麥葉片的呼吸速率始終不變,則在5~15min內(nèi),小麥葉片光合作用的平均速率(用氧氣產(chǎn)生量表示)是________mol/min。

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【題目】研究人員以正常生長的大豆為實驗材料,進行了如圖所示的研究。甲圖為從豆葉中提取、分離得到的四種色素,乙圖反映的是某一溫度下光照強度對光合速率的影響,丙圖選取生理狀態(tài)良好的大豆植株,保持溫度(30)、CO2濃度等恒定,測定不同光照強度條件下O2CO2的釋放量;卮鹣铝袉栴}:

(1)甲圖中溶解度最大的色素是_____________。如果用一直生長于缺鎂環(huán)境中的大豆葉提取、分離色素,與甲圖相比,濾紙條上色素含量顯著減少的有________(填序號)。

(2)若測定缺鎂環(huán)境中生長的大豆(與正常情況下生長的植株大小基本相同)的光合速率與光照強度的關系,與乙圖相比,B點位置變化情況是_______("左移","右移""不移動")。

(3)光反應產(chǎn)生的O2擴散到鄰近細胞的線粒體中被利用至少要經(jīng)過________層生物膜。從圖丙可知,在光照強度為8千勒克斯(klx)時植物合成的葡萄糖的速率為________mgm2h1。在光照強度為 12千勒克斯(klx)時根尖細胞中產(chǎn)生ATP的細胞結(jié)構(gòu)的是__________。

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【題目】關于甲型H1N1流感病毒與H5N1禽流感病毒的有關比較,錯誤的是( )

A.均使感染者發(fā)燒,因此兩者抗原相同

B.感染不同的人后所引起的患病程度可能不同

C.感染正常人體后均能引發(fā)特異性免疫反應

D.均可能發(fā)生基因突變而改變傳染性

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【題目】下圖是艾滋病病毒(HIV左圖)和大腸桿菌噬菌體T4(右圖)的結(jié)構(gòu)模式圖。比較二者的結(jié)構(gòu)和化學組成,下列表述正確的是 ( )

A. 二者核心物質(zhì)都是核酸,外殼的化學結(jié)構(gòu)不同

B. HIV的外殼成分含有磷脂,T4外殼含有核酸

C. 二者都處于生命系統(tǒng)的最基本層次——細胞

D. HIV有細胞膜的結(jié)構(gòu),T4有細胞核的結(jié)構(gòu)

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【題目】下圖為人體內(nèi)部分細胞分化過程示意圖。下列相關敘述錯誤的是( )

A. 上述細胞中,胚胎干細胞的分化程度最低

B. 人體內(nèi)神經(jīng)干細胞分化成神經(jīng)細胞的過程不可逆

C. 造血干細胞的一個顯著特點是進行不對稱分裂

D. 皮膚干細胞分化成皮膚細胞是遺傳物質(zhì)改變引起的

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【題目】下圖分別表示生物體內(nèi)幾種物質(zhì)結(jié)構(gòu)模式圖,據(jù)圖回答:

1)甲圖中的三種物質(zhì)都是由許多_____連接起來的。這三種物質(zhì)中,在功能上與另外兩種截然不同的是_____

2)乙圖所示化合物的基本組成單位可用圖中____ (填數(shù)字或字母)表示,各基本單位之間是通過[ ]__連接起來的。

3)丙是由__種氨基酸聚合而來,該類物質(zhì)功能具有多樣性的根本原因是___。

4)甲乙丙在形成過程中都有_______生成,用l5N進行同位素標記,________ (甲、乙、丙)物質(zhì)能夠被標記。

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