ch1L基因是藍藻擬核DNA上與葉綠素合成有關的基因。為研究該基因對葉綠素合成的控制,需要構建該種生物缺失ch1L基因的變異株細胞。構建過程如下:
第①步:用PCR技術從藍藻環(huán)狀DNA中擴增出ch1L基因片段。
第②步:將ch1L基因與質粒構建形成重組質粒1。
第③步:將重組質粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除,用一段紅霉素抗性基因取代之,得到重組質粒2。
第④步:將重組質粒2導入藍藻細胞,由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長的序列相同,所以能準確地與其發(fā)生同源重組,產生出缺失ch1L基因的突變株。請根據上述資料,回答下列問題:
(1)第①步用PCR技術擴增DNA片段時用到的耐高溫的酶通常是指什么酶? 。
PCR擴增DNA時必須加入引物,其作用是 。
(2)利用PCR技術擴增DNA一般要經過三十多次循環(huán),每次循環(huán)都要經過三個步驟,其中“復性”這一步驟發(fā)生的變化是 。
(3)構建重組質粒1、2時,為保證成功率,往往使用 酶對基 因和質粒進行切割,以切出相同的黏性末端,便于連接。此酶的作用是將DNA分子的 鍵打開。
(4)質粒是基因工程中最常用的運載體,其化學本質是 ,此外還可用噬菌體、動植物病毒作用為運載體。
(5)導入重組質粒2以后,往往還需要進行檢測和篩選,可用 制成探針,檢測是否導入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入 可將變異株細胞篩選出來。
(1)TaqDNA聚合酶 與模板結合,使DNA聚合酶從引物3’端延伸DNA鏈
(2)引物通過堿基互補與DNA模板鏈結合
(3)同一種DNA限制性內切酶 磷酸二酯鍵
(4)小型環(huán)狀DNA
(5)紅霉素抗性基因 紅霉素
【解析】
試題分析:(1)PCR中DNA聚合酶具有耐高溫的能力,稱為TaqDNA聚合酶;引物一般為一小段單鏈DNA或RNA,與模板結合,使DNA聚合酶從引物3’端延伸DNA鏈。
(2)PCR分三步:第一是變性,主要是DNA雙鏈解開,第二是退火,也稱復性,主要是引物與DNA單鏈結合,第三是延伸,主要是新的DNA單鏈延伸。
(3)注意用同一種限制性內切酶,才能切出相同的黏性末端,從而才能相連;限制性內切酶破壞的是磷酸二酯鍵。
(4)質粒是存在于細菌擬核外能夠自主復制呈環(huán)狀的很小的DNA分子。
(5)因為重組質粒中含有紅霉素抗性基因,所以可用紅霉素抗性基因制成探針,讓探針與重組質粒中含有紅霉素抗性基因發(fā)生雜交。在含有紅霉素的培養(yǎng)基中,如果細菌仍能生存,說明導入了重組基因。
考點:本題考查基因工程以及PCR技術的相關知識,意在考查考生理解所學知識的要點,把握知識間的內在聯(lián)系的能力。
科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
ch1L基因是藍藻擬核DNA上與葉綠素合成有關的基因。為研究該基因對葉綠素合成的控制,需要構建該種生物缺失ch1L基因的變異株細胞。構建過程如下:
第①步:用PCR技術從藍藻環(huán)狀DNA中擴增出ch1L基因片段。
第②步:將ch1L基因與質粒構建形成重組質粒1。
第③步:將重組質粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除,用一段紅霉素抗性基因取代之,得到重組質粒2。
第④步:將重組質粒2導入藍藻細胞,由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長的序列相同,所以能準確地與其發(fā)生同源重組,產生出缺失ch1L基因的突變株。請根據上述資料,回答下列問題:
(1)第①步用PCR技術擴增DNA片段時用到的耐高溫的酶通常是指什么酶? 。
PCR擴增DNA時必須加入引物,引物的實質是 ,其作用是 。
(2)利用PCR技術擴增DNA一般要經過三十多次循環(huán),每次循環(huán)都要經過三個步驟,其中“復性”這一步驟發(fā)生的變化是 。為消除PCR擴增過程當中外源DNA污染造成的影響,應如何設置對照? 。
(3)構建重組質粒1、2時,為保證成功率,往往使用 酶
對基因和質粒進行切割,以切出相同的黏性末端,便于連接。此酶的作用是將DNA分子的 鍵打開。
(4)質粒是基因工程中最常用的運載體,其化學本質是 ,此外還可用噬菌體、動植物病毒作用為運載體。
(5)導入重組質粒2以后,往往還需要進行檢測和篩選,可用 制成探針,檢測是否導入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入 可將變異株細胞篩選出來。
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科目:高中生物 來源:湖南省雅禮中學2010屆高三第三次月考生物試卷 題型:綜合題
(10分)ch1L基因是藍藻擬核DNA上與葉綠素合成有關的基因。為研究該基因對葉綠素合成的控制,需要構建該種生物缺失ch1L基因的變異株細胞。構建過程如下:
第①步:用PCR技術從藍藻環(huán)狀DNA中擴增出ch1L基因片段。
第②步:將ch1L基因與質粒構建形成重組質粒1。
第③步:將重組質粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除,用一段紅霉素抗性基因取代之,得到重組質粒2。
第④步:將重組質粒2導入藍藻細胞,由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長的序列相同,所以能準確地與其發(fā)生同源重組,產生出缺失ch1L基因的突變株。請根據上述資料,回答下列問題:
(1)第①步用PCR技術擴增DNA片段時用到的耐高溫的酶通常是指什么酶? 。
PCR擴增DNA時必須加入引物,引物的實質是 ,其作用是 。
(2)利用PCR技術擴增DNA一般要經過三十多次循環(huán),每次循環(huán)都要經過三個步驟,其中“復性”這一步驟發(fā)生的變化是 。為消除PCR擴增過程當中外源DNA污染造成的影響,應如何設置對照? 。
(3)構建重組質粒1、2時,為保證成功率,往往使用 酶
對基因和質粒進行切割,以切出相同的黏性末端,便于連接。此酶的作用是將DNA分子的 鍵打開。
(4)質粒是基因工程中最常用的運載體,其化學本質是 ,此外還可用噬菌體、動植物病毒作用為運載體。
(5)導入重組質粒2以后,往往還需要進行檢測和篩選,可用 制成探針,檢測是否導入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入 可將變異株細胞篩選出來。
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科目:高中生物 來源:湖南省2010屆高三第三次月考生物試卷 題型:綜合題
(10分)ch1L基因是藍藻擬核DNA上與葉綠素合成有關的基因。為研究該基因對葉綠素合成的控制,需要構建該種生物缺失ch1L基因的變異株細胞。構建過程如下:
第①步:用PCR技術從藍藻環(huán)狀DNA中擴增出ch1L基因片段。
第②步:將ch1L基因與質粒構建形成重組質粒1。
第③步:將重組質粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除,用一段紅霉素抗性基因取代之,得到重組質粒2。
第④步:將重組質粒2導入藍藻細胞,由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長的序列相同,所以能準確地與其發(fā)生同源重組,產生出缺失ch1L基因的突變株。請根據上述資料,回答下列問題:
(1)第①步用PCR技術擴增DNA片段時用到的耐高溫的酶通常是指什么酶? 。
PCR擴增DNA時必須加入引物,引物的實質是 ,其作用是 。
(2)利用PCR技術擴增DNA一般要經過三十多次循環(huán),每次循環(huán)都要經過三個步驟,其中“復性”這一步驟發(fā)生的變化是 。為消除PCR擴增過程當中外源DNA污染造成的影響,應如何設置對照? 。
(3)構建重組質粒1、2時,為保證成功率,往往使用 酶
對基因和質粒進行切割,以切出相同的黏性末端,便于連接。此酶的作用是將DNA分子的 鍵打開。
(4)質粒是基因工程中最常用的運載體,其化學本質是 ,此外還可用噬菌體、動植物病毒作用為運載體。
(5)導入重組質粒2以后,往往還需要進行檢測和篩選,可用 制成探針,檢測是否導入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入 可將變異株細胞篩選出來。
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科目:高中生物 來源:0110 模擬題 題型:讀圖填空題
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