Question

【題目】物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，會污染土壤，W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明，某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌。回答下列問題：

（1）要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是_____。

（2）發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長并形成菌落（如圖所示），如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇____菌落進(jìn)一步純化，選擇的依據(jù)是______________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈�源，若要設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用氮?dú)庾鳛榈�源，請簡要寫出�?shí)驗(yàn)思路__________________________。

（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)，請完善相關(guān)內(nèi)容。

①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加_____，三處滴加量相同。

②一段時(shí)間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明_____________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明________________。

Answer 1

【答案】W 乙 乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W 將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，觀察細(xì)菌能否正常生長 緩沖液 緩沖液不能降解W 酶E與天然酶降解W的能力相近

【解析】

篩選培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)δ承┗瘜W(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的，能選擇性地區(qū)分這種微生物的培養(yǎng)基。利用選擇培養(yǎng)基，可使混合菌群中的目標(biāo)菌種變成優(yōu)勢種群，從而提高該種微生物的篩選效率。

（1）該研究小組的目標(biāo)菌是能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌，而物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，故可作篩選培養(yǎng)基中的氮源。

（2）研究小組的目標(biāo)菌，是能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌，培養(yǎng)基中乙菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌落能夠降解物質(zhì)W，故乙菌落為該小組的目標(biāo)細(xì)菌。

（3）目標(biāo)菌能夠利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈�源，故選用的篩選培養(yǎng)基不添加氮源，能夠在無氮源的培養(yǎng)基上生存的細(xì)菌便是目的細(xì)菌，故實(shí)驗(yàn)操作為：將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈�源�?/span>

（4）①C處作為空白對照，要排除作為溶劑的緩沖液對實(shí)驗(yàn)可能造成的影響，故需要在C處滴加緩沖液，且保持滴加量相同。

②培養(yǎng)基中的透明圈大小表示物質(zhì)W被降解的情況，若C處不出現(xiàn)透明圈，則說明緩沖液不能降解物質(zhì)W；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明物質(zhì)W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近。