Question

【題目】下圖是科學(xué)家利用現(xiàn)代生物技術(shù)研制用于癌癥治療的鼠-人嵌合抗體的流程圖。請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)鼠源雜交瘤抗體進(jìn)行改造時(shí)，首先必須根據(jù)預(yù)期_______________________，設(shè)計(jì)_________________，進(jìn)一步推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，最終通過(guò)基因拼接，將鼠源抗體基因改造成鼠一人嵌合抗體基因，然后導(dǎo)入鼠淋巴細(xì)胞中使其 。在Ig基因表達(dá)載體構(gòu)建的過(guò)程中，人和鼠的基因要用 切割核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（2）圖中嵌合載體啟動(dòng)子位于基因的首端，它是_____________識(shí)別和結(jié)合的部位，終止子是___________的終點(diǎn)；嵌合載體中還應(yīng)含有___________________，以便重組DNA的鑒定和篩選。

（3）圖中的“抗體分泌細(xì)胞”名稱(chēng)是________，檢測(cè)目的基因在淋巴細(xì)胞中是否得到表達(dá)可采用_____技術(shù)。

（4）在制備單克隆嵌合抗體過(guò)程中要進(jìn)行篩選，第二次篩選的目的是___________________________。

Answer 1

【答案】（1）嵌合抗體的功能 嵌合抗體的結(jié)構(gòu) 表達(dá) 同種限制酶

（2）RNA聚合酶 轉(zhuǎn)錄 標(biāo)記基因

（3）漿細(xì)胞 抗原-抗體雜交

（4）獲得能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞

【解析】

試題分析：（1）蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA），所以利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)鼠源雜交瘤抗體進(jìn)行改造時(shí)，首先必須根據(jù)預(yù)期鼠一人嵌合抗體的功能設(shè)計(jì)預(yù)期嵌合抗體的結(jié)構(gòu)，進(jìn)一步推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，最終通過(guò)基因拼接，將鼠源抗體基因改造成鼠-人嵌合抗體基因，然后導(dǎo)入鼠淋巴細(xì)胞中使其表達(dá)；在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中，用同一種限制酶能切割核苷酸之間的磷酸二酯鍵，可以形成相同的黏性末端。

（2）啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位；終止子是轉(zhuǎn)錄終止的信號(hào)；基因表達(dá)載體中含有啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因，其中標(biāo)記基因用于重組DNA的鑒定和篩選。

（3）圖中的“抗體分泌細(xì)胞”的名稱(chēng)是漿細(xì)胞；檢測(cè)目的基因是否在受體細(xì)胞中表達(dá)，由于表達(dá)產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，因此常采用抗原-抗體雜交技術(shù)。

（4）制備單克隆抗體時(shí)要經(jīng)過(guò)兩次篩選，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是獲得能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。