Question

【題目】[生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題]Bt基因即是蘇云金芽胞桿菌（Badcillus thuringiensis，簡(jiǎn)稱Bt)基因，因其表達(dá)產(chǎn)物Bt毒蛋白殺蟲(chóng)效果好、安全、高效等優(yōu)點(diǎn)而成為應(yīng)用最為廣泛的轉(zhuǎn)殺蟲(chóng)基因。下圖為培育轉(zhuǎn)Bt基因苗的基本操作過(guò)程。

(1)Bt基因可從構(gòu)建的Bt基因組文庫(kù)中獲取，也可以從其cDNA文庫(kù)中獲取，從前者獲取的基因______(填“含有”或“不含有”)啟動(dòng)子。若利用PCR技術(shù)從cDNA文庫(kù)中獲取Bt基因（基因序列未知），需根據(jù)Bt蛋白氨基酸序列設(shè)計(jì)引物，引物的序列可以有多種，原因是_____________.在PCR體系中需加入其中的____(填“全部”或“任意1種”或“其中2種”)引物，若Bt基因序列已知，則引物的序列通常為_____種。

(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中，為了方便篩選含有目的基因的細(xì)胞，作為運(yùn)載體的Ti質(zhì)粒應(yīng)含有_____基因，其中________是驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄的酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，而能幫助目的基因整合到宿主細(xì)胞染色體上的序列稱為____________。圖示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法是_________________。

(3)步驟Ⅳ中產(chǎn)生的細(xì)胞團(tuán)稱為____________,步驟Ⅳ和Ⅴ過(guò)程要注意控制培養(yǎng)基中___________的濃度比例，以便獲得幼苗。

Answer 1

【答案】 含有 一種氨基酸可能有多種密碼子，對(duì)應(yīng)生物DNA堿基序列就會(huì)有多種 全部 2 標(biāo)記基因（抗性基因） 啟動(dòng)子 T-DNA（可轉(zhuǎn)移DNA） 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 愈傷組織 生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素

【解析】試題分析：本題圖文結(jié)合的形式綜合考查學(xué)生對(duì)基因工程及其應(yīng)用的掌握情況。梳理基因工程的基本操作步驟、植物組織培養(yǎng)的過(guò)程，通過(guò)提取圖中的信息并結(jié)合題意進(jìn)行相關(guān)試題的解答。

(1) 基因組文庫(kù)是指含有某種生物全部基因隨機(jī)片段的重組DNA克隆群體，因此從基因組文庫(kù)中獲取的Bt基因含有啟動(dòng)子。根據(jù)Bt蛋白氨基酸序列設(shè)計(jì)引物，需先依據(jù)Bt蛋白的氨基酸序列→推測(cè)相應(yīng)的mRNA的堿基序列→進(jìn)而推測(cè)出Bt基因的堿基序列，再依據(jù)Bt基因的堿基序列設(shè)計(jì)引物。由于一種氨基酸可能有多種密碼子，對(duì)應(yīng)生物DNA堿基序列就會(huì)有多種， 所以根據(jù)Bt蛋白氨基酸序列設(shè)計(jì)的引物序列可以有多種。由于從cDNA文庫(kù)中獲取的Bt基因序列未知，因此在PCR體系中需加入其中的全部引物；若Bt基因序列已知，則引物的序列通常為2 種。

(2) 在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中，為了方便篩選含有目的基因的細(xì)胞，作為運(yùn)載體的Ti質(zhì)粒應(yīng)含有標(biāo)記基因（抗性基因）基因。啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)。Ti質(zhì)粒中的T-DNA（可轉(zhuǎn)移DNA）能幫助目的基因整合到宿主細(xì)胞染色體上。圖示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

(3) 步驟Ⅳ中經(jīng)過(guò)脫分化產(chǎn)生的細(xì)胞團(tuán)稱為愈傷組織，步驟Ⅳ至Ⅴ過(guò)程為再分化，要注意控制培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的濃度比例，以便獲得幼苗。