Question

9．有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境．研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解．分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過程如圖甲、乙所示．

（1）微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、氮源和無機(jī)鹽四類，該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖．
（2）實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌．純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是接種環(huán)．劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，而其它劃線上有菌落．造成第一劃線區(qū)無菌落可能的操作失誤有①接種環(huán)灼燒后未冷卻②劃線未從第一區(qū)域末端開始．
（3）為探究苯磺隆的降解機(jī)制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液作圖乙所示實(shí)驗(yàn)．該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是目的菌株能分泌降解苯磺隆的酶，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否能很好證明？不合理，為什么？缺少空白對(duì)照．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示是探索苯磺隆降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過程，圖甲中，首先用選擇培養(yǎng)基從土壤中篩選出菌種，再采用平板劃線法純化出相應(yīng)的菌種；圖乙中：通過測(cè)定苯磺隆的濃度測(cè)定其降解率．據(jù)此答題．

解答 解：（1）微生物的各種培養(yǎng)基配方一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽四類營養(yǎng)；選擇培養(yǎng)基只允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，又要抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)，因而必須以苯磺隆為唯一碳源只讓目的菌株生存繁殖．
（2）實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌．純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是接種環(huán)（或接種針）；接種環(huán)在平板內(nèi)的每一次劃線前，都要先灼燒滅菌冷卻后劃線，而且要從上一次劃線末端而非空白處劃線，不冷卻會(huì)燙死上次劃線末端菌株，從空白處劃線是不會(huì)有菌株的．
（3）從圖乙上清液中加入蛋白酶溶液可知是用于水解上清液中的某蛋白質(zhì)的，由此可判定實(shí)驗(yàn)假設(shè)是目的菌株通過分泌某種蛋白質(zhì)來降解苯磺隆，但是尚需設(shè)置不加入蛋白酶的對(duì)照組實(shí)驗(yàn)，否則沒有說服力，因而不合理．
故答案為：
（1）氮源和無機(jī)鹽    只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖
（2）干熱滅菌   灼燒滅菌    接種環(huán)    ①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開始
（3）目的菌株能分泌降解苯磺隆的酶（蛋白質(zhì)）     不合理     缺少空白對(duì)照

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合探究實(shí)驗(yàn)過程，考查微生物的培養(yǎng)和分離、探究實(shí)驗(yàn)等知識(shí)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、種類及作用；掌握分離微生物常用的兩種方法及操作過程；掌握探究實(shí)驗(yàn)的原則，能結(jié)合圖中信息知識(shí)答題．