Question

【題目】人乳頭狀瘤病毒（HPV）與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗HPV的單克隆抗體可以準確檢測出HPV，從而及時監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生，以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程，請據(jù)圖回答：

（1）單克隆抗體制備過程中涉及的細胞工程技術(shù)有________________。

（2）將經(jīng)融合處理后的細胞轉(zhuǎn)到HAT接著基上培養(yǎng)的目的是 ，該細胞 （填“能”、“不能”）產(chǎn)生專一性抗體，所產(chǎn)生的抗體 （填“一定”、“不一定”）能抗HPV。

（3）對于抗體檢測呈______性的雜交瘤細胞克隆應(yīng)進行克隆化培養(yǎng)，克隆化培養(yǎng)的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細胞到3～10個/mL，每孔加入細胞稀釋液______mL（填“0．1”、“1”或“10”），使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的。

（4）科學家從某些無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出了無限增殖調(diào)控基因（prG），該基因能激發(fā)動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的一種制備單克隆抗體技術(shù)外，請再簡要寫出一種制備單克隆抗體的思路____________________。

Answer 1

【答案】（1）動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合

（2）篩選出雜交瘤細胞 能 不一定

（3）陽 0．1

（4）通過基因工程向效應(yīng)B細胞中導入prG或利用核移植技術(shù)將效應(yīng)B細胞的細胞核移植到去核的無限增殖細胞中（答對其一即可）

【解析】（1）骨髓瘤細胞和某些淋巴細胞在融合前需借助動物細胞培養(yǎng)技術(shù)進行培養(yǎng)，融合時采用的技術(shù)手段是動物細胞融合技術(shù)。

（2）將骨髓瘤細胞和某些淋巴細胞混合并進行融合、轉(zhuǎn)移到HAT培養(yǎng)基上培養(yǎng)的目的是篩選出雜交瘤細胞，該細胞能產(chǎn)生專一性抗體。因所有的雜交瘤細胞在HAT接著基上都能生長增殖，因此篩選出的雜交瘤細胞所產(chǎn)生的抗體不一定能抗HPV。

（3）抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞所分泌的抗體才是抗HPV的抗體，因此對于此類細胞需進行克隆化培養(yǎng)，克隆化培養(yǎng)的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細胞到3～10個/mL，每孔加入細胞稀釋液0．1 mL，使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的。

（4）抗體是由效應(yīng)B細胞合成分泌的。利用無限增殖調(diào)控基因（prG）制備單克隆抗體，可以借助基因工程技術(shù)，其思路是：通過基因工程向效應(yīng)B細胞中導入prG；也可以借助核移植技術(shù)，其思路是：利用核移植技術(shù)將效應(yīng)B細胞的細胞核移植到去核的無限增殖細胞中。