Question

6．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上，常常需要進(jìn)行微生物的培養(yǎng)和計數(shù)．
（1）如圖是利用平板劃線法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．
（2）分析下面培養(yǎng)基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄7H₂O、KC1、H₂O．若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，則應(yīng)除去上述成分中的NaNO₃，并加入尿素和葡萄糖，以補(bǔ)充碳源和氮源．
（3）用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品巾細(xì)菌數(shù)量．若在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為233，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是1.165×10⁹、涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2mL）．
（4）某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株．在篩選過程中應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基上．從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基；從物理狀態(tài)上看該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基．為了篩選出高效菌株，應(yīng)該比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力強(qiáng)．

Answer 1

分析 微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法．若要對微生物進(jìn)行取樣計數(shù)，接種方法只能是稀釋涂布平板法．稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)．培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽．

解答 解：（1）由圖可知，其采取的是平板劃線法，該方法能把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．
（2）培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，其氮源是尿素，所以培養(yǎng)基中要除去含氮物質(zhì)，即去除NaNO₃，并加入尿素和葡萄糖，以提供氮源和碳源．
（3）在稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為233，那么每毫升樣品（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2mL） 中的菌落數(shù)是=10⁵×233×$\frac{1}{2}$=1.165×10⁹個．
（4）篩選出能高效降解原油的菌株需要使用以原油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，從物理狀態(tài)上看該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，為了篩選出高效菌株，應(yīng)該比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力強(qiáng)．
故答案為：
（1）平板劃線    稀釋
（2）NaNO₃    尿素和葡萄糖   
（3）1.165×10⁹
（4）原油    選擇   固體   強(qiáng)

點(diǎn)評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、測定某種微生物的數(shù)量等知識，要求考生識記培養(yǎng)基的成分和微生物的接種方法，并能準(zhǔn)確判斷圖中的接種方法；能采用稀釋涂布平板法對微生物進(jìn)行計數(shù)，并能對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析和簡單的計算．