Question

【題目】取同種生物的不同類型細胞，檢測其基因表達，結果如圖1，回答下列相關問題．

（1）基因1～8中有一個是控制核糖體蛋白質合成的基因，則該基因最有可能是基因_____。

（2）圖所示細胞中功能最為近似的是細胞_____。

A.1與6 B.2與5C.2與3D.4與5

（3）判斷圖中細胞功能近似程度的依據是_____

（4）如圖2為三種質粒和一個含目的基因的片段的示意圖．圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環(huán)素抗性基因，lacZ為藍色顯色基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等為限制酶及其切割的位點與復制原點的距離，1Kb＝1000個堿基對長度．請據圖回答：

①質粒A、C不能作為目的基因運載體的理由分別是_____、_____．

②將圖中的目的基因與質粒B進行重組，需要用到_____酶．如果是兩兩重組，可能有_____種長度的重組結果。

③在基因工程實驗的過程中，檢查目的基因是否重組到質粒中，也是一個重要的一步．現使用_____酶切重組質粒，完全酶切后，進行電泳檢測．若電泳圖譜中出現長度為1.1kb和_____kb，或者_____kb和_____kb的片段，則基本上可以判斷該重組質粒已與目的基因重組成功（重組質粒上目的基因的插入位點與EcoRⅠ的識別位點之間的堿基對忽略不計）。

④下列關于基因工程常用運載體﹣﹣質粒的說法正確的是_____。

A．質粒通常是來自于細菌的環(huán)狀DNA分子，使用質粒運載體是為了避免目的基因被分解

B．質粒運載體只能在與目的基因重組后進入細胞

C．質粒上具有多種限制酶切點，以便于切割后與目的基因連接．沒有限制酶就無法使用質粒運載體

D．質粒運載體的復制和表達也遵循中心法則

Answer 1

【答案】2 A 表達的相同基因最多，表達的差異基因最少 缺少標記基因 復制原點被限制酶切割 限制酶（PvuⅠ）和DNA連接酶 3 EcoRⅠ酶 5.6 3.1 3.6 ACD

【解析】

分析圖1：圖1表示7種細胞中8種基因的表達情況，不同細胞選擇表達的基因種類有區(qū)別，其中2號基因在7種細胞中均表達；1號和6號細胞表達的基因最為相似。分析圖2：圖2表示三種質粒和一個含目的基因的片段的示意圖，圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環(huán)素抗性基因，lacZ為藍色顯色基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等為限制酶及其切割的位點與復制原點的距離。目的基因在與運載體相連時要保證重組質粒上含有標記基因，以便于篩選導入了重組質粒的受體細胞。

（1）幾乎所有細胞都含有核糖體，所以控制核糖體合成的基因幾乎在所有細胞都表達，因此基因1～8中，2基因最可能是控制核糖體蛋白質合成的基因。

（2）1和6細胞表達的基因最為相似，所以1和6細胞功能最為近似，即A正確，BCD錯誤。

（3）1和6細胞表達的相同基因最多，表達的差異基因最少，所以兩者功能最為近似。

（4）①由圖可知，質粒A中缺少標記基因，質粒C中的復制原點被酶切割，所以A、C不能作為運載體。

②由圖可知，獲取目的基因使用的限制酶是PvuⅠ，所以切割質粒B也用該限制酶，同時目的基因與運載體連接的時候還需要DNA連接酶。用DNA連接酶連接時，可能出現質粒環(huán)化、目的基因環(huán)化、形成重組質粒共3種長度的結果。

③質粒長度為2.7kb，目的基因長度為4.0kb，所以重組質粒長度為6.7kb，出現長度為1.1kb，則使用EcoRⅠ酶切割的，另一個長度為5.6kb，若目的基因重組時倒置，可形成3.1kb和3.6kb的片段。

④A、質粒通常是來自于細菌的環(huán)狀DNA分子，使用質粒運載體是為了避免目的基因被分解，A正確；

B、質粒運載體自身也能進入細胞，B錯誤；

C、質粒上具有多種限制酶切點，以便于切割后與目的基因連接。沒有限制酶就無法使用質粒運載體，C正確；

D、質粒運載體的復制和表達也遵循中心法則，D正確。

故選ACD。