Question

13．水污染是全球性的環(huán)境問(wèn)題，微生物降解是水污染治理的有效手段之一．聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一種難以降解的大分子有機(jī)物，PVA分解菌能產(chǎn)生PVA酶分解PVA，PVA與碘作用時(shí)能產(chǎn)生藍(lán)綠色復(fù)合物，當(dāng)PVA被分解時(shí)藍(lán)綠色復(fù)合物消失，形成白色透明斑，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）如表是篩選出能高效分解PVA的細(xì)菌的培養(yǎng)基配方，表中X物質(zhì)最可能為聚乙烯醇（或PVA）．實(shí)驗(yàn)中還應(yīng)設(shè)置完全培養(yǎng)液對(duì)照組，將菌液稀釋相同的倍數(shù)，對(duì)照組培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于（填“多于”或“少于”選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，從而說(shuō)明選擇培養(yǎng)基具有篩選作用．）

成分	MgSO4	蛋白質(zhì)	X物質(zhì)	水	瓊脂
用量	5g	10g	1000mL	7g	20g

（2）要測(cè)定土壤稀釋液中微生物的數(shù)目，可在顯微鏡下用血細(xì)胞（血球）計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)．若將100mL含有PVA分解菌的土壤樣品溶液稀釋10⁴倍后，取0.1mL稀釋液均勻涂布在選擇培養(yǎng)基表面，測(cè)得菌落數(shù)的平均值為160個(gè)，空白對(duì)照組平板上未出現(xiàn)菌落，則100mL原菌液中有PVA分解菌1.6×10⁹個(gè)，該方法的測(cè)量值與實(shí)際值相比一般會(huì)偏�。ㄌ睢捌�大”、“偏小”或“相等”）．
（3）要鑒定分離出的細(xì)菌是否為PVA分解菌，培養(yǎng)PVA分解菌的培養(yǎng)基中除了加入必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還需要加入碘用于鑒別PVA分解菌．若用上述培養(yǎng)基比較不同菌株降解PVA能力的大小，請(qǐng)用簡(jiǎn)潔的語(yǔ)言寫(xiě)出設(shè)計(jì)思路：用含相同PVA濃度的上述培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)不同菌株，一定時(shí)間后，通過(guò)測(cè)定白色透明斑的大�。ɑ蛑睆剑﹣�(lái)確定不同菌株降解PVA能力的大�。�

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率．
2、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）分析題意可知，表格是篩選出能高效分解PVA的細(xì)菌的培養(yǎng)基配方，即該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，因此表中X物質(zhì)最可能為聚乙烯醇（或PVA）．由于完全培養(yǎng)液中任何微生物都可以生長(zhǎng)，因此對(duì)照組培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，從而說(shuō)明選擇培養(yǎng)基具有篩選作用．
（2）要測(cè)定土壤稀釋液中微生物的數(shù)目，可在顯微鏡下用血細(xì)胞（血球）計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)．若將100mL含有PVA分解菌的土壤樣品溶液稀釋10⁴倍后，取0.1mL稀釋液均勻涂布在選擇培養(yǎng)基表面，測(cè)得菌落數(shù)的平均值為160個(gè)，空白對(duì)照組平板上未出現(xiàn)菌落，則100mL原菌液中有PVA分解菌=160÷0.1×10⁴×100=1.6×10⁹個(gè)；由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌聚集在一起只能產(chǎn)生一個(gè)菌落，因此該方法的測(cè)量值與實(shí)際值相比一般會(huì)偏�。�
（3）根據(jù)題意可知，“PVA與碘作用時(shí)能產(chǎn)生藍(lán)綠色復(fù)合物，當(dāng)PVA被分解時(shí)藍(lán)綠色復(fù)合物消失，形成白色透明斑”，因此要鑒定分離出的細(xì)菌是否為PVA分解菌，培養(yǎng)PVA分解菌的培養(yǎng)基中還需要加入碘用于鑒別PVA分解菌．若用上述培養(yǎng)基比較不同菌株降解PVA能力的大小，可以用含相同PVA濃度的上述培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)不同菌株，一定時(shí)間后，通過(guò)測(cè)定白色透明斑的大�。ɑ蛑睆剑﹣�(lái)確定不同菌株降解PVA能力的大�。�
故答案為：
（1）聚乙烯醇（或PVA）      多于
（2）血細(xì)胞（血球）    1.6×10⁹     偏小
（3）碘          用含相同PVA濃度的上述培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)不同菌株，一定時(shí)間后，通過(guò)測(cè)定白色透明斑的大�。ɑ蛑睆剑﹣�(lái)確定不同菌株降解PVA能力的大小

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠題干信息確定PVA分解菌的分離方法，識(shí)記選擇培養(yǎng)基的選擇遠(yuǎn)離，同時(shí)能夠結(jié)合所學(xué)知識(shí)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)思路來(lái)比較不同菌株降解PVA能力的大�。�