Question

【題目】神經(jīng)纖毛蛋白-1 (NRP-1) 是一種多功能糖蛋白，在多種腫瘤組織中呈高表達(dá)，可與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子結(jié)合促進(jìn)腫瘤血管的形成，使腫瘤體積增大�？蒲腥藛T通過(guò)制備NRP-1單克隆抗體，開展對(duì)小鼠的乳腺癌腫塊進(jìn)行靶向治療的研究。請(qǐng)分析回答：

（1）制備單克隆抗體涉及的動(dòng)物細(xì)胞工程常用技術(shù)手段有_________________________(寫出兩項(xiàng))。

（2）制備時(shí)，首先給小鼠注射___________________________，分離得到B細(xì)胞。將B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合后得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)系列處理選出______________________細(xì)胞注射到小鼠腹腔中，從腹水中提取到大量的NRP-1單克隆抗體。

（3）為了論證制取的單克隆抗體的治療效果，研究者選擇生長(zhǎng)狀況一致的小鼠，分別注射等量的乳腺癌細(xì)胞懸液，經(jīng)飼養(yǎng)后，各小鼠均形成了體積基本相同的腫瘤。

①將上述小鼠隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組應(yīng)分別注射____________，___________________，且每隔3天重復(fù)進(jìn)行相同的注射操作，一段時(shí)間后測(cè)算發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組小鼠的腫瘤體積都小于對(duì)照組，原因可能是_________________________發(fā)生特異性結(jié)合，阻斷了___________________________的結(jié)合，從而抑制了腫瘤內(nèi)血管生成，導(dǎo)致腫瘤體積減小。

②上述實(shí)驗(yàn)小鼠應(yīng)選用沒有___________________(器官)的動(dòng)物模型鼠，由于這種鼠存在免疫缺陷，實(shí)驗(yàn)時(shí)可以避免小鼠的免疫系統(tǒng)對(duì)NRP-1單克隆抗體和乳腺癌腫塊進(jìn)行攻擊，從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可靠。

Answer 1

【答案】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合 NRP-1（神經(jīng)纖毛蛋白-1） 能產(chǎn)生NRP-1抗體的雜交瘤（既能產(chǎn)生NRP-1抗體又能無(wú)限增殖的） NRP-1單克隆抗體溶液 （等量的）生理鹽水 NRP-1單克隆抗體與NRP-1 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與NRP-1 胸腺

【解析】

單克隆抗體制備過(guò)程如下：

（1）制備單克隆抗體，需要通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)獲得雜交瘤細(xì)胞，然后通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得單克隆抗體。

（2）制備NRP-1單克隆抗體時(shí)，首先給小鼠注射神經(jīng)纖毛蛋白-1，從小鼠脾臟分離得到B細(xì)胞，然后將B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合后得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)系列處理選出既能產(chǎn)生NRP-1抗體又能無(wú)限增殖的細(xì)胞注射到小鼠腹腔中，從腹水中提取到大量的NRP-1單克隆抗體。

（3）①驗(yàn)證制取NRP-1單克隆抗體的治療效果，應(yīng)進(jìn)行是否注射NRP-1單克隆抗體的對(duì)照實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)組應(yīng)注射一定生理鹽水配制的NRP-1單克隆抗體溶液，對(duì)照組應(yīng)分別注射等量的生理鹽水。實(shí)驗(yàn)組小鼠的腫瘤體積都小于對(duì)照組，原因可能是NRP-1單克隆抗體與NRP-1發(fā)生特異性結(jié)合，阻斷了血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與NRP-1的結(jié)合，從而抑制了腫瘤內(nèi)血管生成，導(dǎo)致腫瘤體積減小。

②上述實(shí)驗(yàn)小鼠應(yīng)選用沒有胸腺的動(dòng)物模型鼠，由于這種鼠存在免疫缺陷，實(shí)驗(yàn)時(shí)可以避免小鼠的免疫系統(tǒng)對(duì)NRP-1單克隆抗體和乳腺癌腫塊進(jìn)行攻擊，從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可靠。