Question

【題目】植物的抗旱機制很大程度上依賴植物激素脫落酸．2016年2月，中、美兩國科學家宣布發(fā)現了PYL9蛋白（脫落酸的一種受體蛋白），利用轉基因技術實現了啟動子pRD29A控制PYL9過量表達，讓水稻自身產生大量PYL9蛋白，顯著提高了其抗旱性．請回答：
（1）已知PYL9蛋白的氨基酸序列，培育轉基因抗旱水稻可用法來獲得PYL9基因．
（2）一個PYL9基因進行擴增最簡便的方法是使用技術，如果這個過程中消耗了引物62個，則進行了輪的DNA復制．
（3）科學家通過農桿菌轉化法成功培育了該轉基因水稻．構建的基因表達載體上除了圖示標注外，還必須含有 ， 所填充的這些序列（需要/不需要）全部轉入到農桿菌Ti質粒的T﹣DNA區(qū)域．
（4）導入目的基因的重組細胞可通過技術培育成完整植株．
（5）檢測水稻細胞是否含有PYL9基因的分子工具是 ． 從個體水平上檢測轉基因水稻是否有抗性及抗性程度的方法是 ．

Answer 1

【答案】
（1）人工合成
（2）PCR；5
（3）啟動子pRD29A、PYL9基因、終止子；需要
（4）植物組織培養(yǎng)
（5）DNA分子探針/基因探針；轉基因水稻植株分別種植在干旱程度（或含水量）不同的田地里（觀察其生長狀況以檢測其是否有抗性及抗性程度）
【解析】解：（1）在已知PYL9蛋白的氨基酸序列，可以推測基因的脫氧核苷酸序列，因此培育轉基因抗旱水稻可用人工合成方法來獲得目的基因．（2）一個PYL9基因進行擴增最簡便的方法是使用PCR技術．第一輪：1個DNA含2條脫氧核苷酸鏈復制得2個DNA4條脫氧核苷酸鏈消耗2個引物；第二輪：2個DNA含4條脫氧核苷酸鏈復制得4個DNA8條脫氧核苷酸鏈消耗（22﹣2）×2+2=6個引物；第三輪：22個DNA含8條脫氧核苷酸鏈復制得23個DNA16條脫氧核苷酸鏈消耗（23﹣2）×2+2=14個引物；第四輪：23個DNA含16條脫氧核苷酸鏈復制得24個DNA32條脫氧核苷酸鏈消耗（24﹣2）×2+2=30個引物；第三輪：24個DNA含32條脫氧核苷酸鏈復制得25個DNA64條脫氧核苷酸鏈消耗（25﹣2）×2+2=62個引物．（3）基因表達載體的組成包括目的基因（PYL9基因）、標記基因、復制原點、啟動子和終止子等．科學家通過農桿菌轉化法成功培育了該轉基因水稻．需要將目的基因轉入到農桿菌Ti質粒的T﹣DNA區(qū)域，之后才可以轉移到水稻細胞的染色體上．（4）導入目的基因的重組細胞培育成完整植株，所用的技術是植物組織培養(yǎng)技術，這一過程體現了植物細胞的全能性．（5）檢測目的基因是否導入受體細胞常用DNA分子雜交技術，該方法常用的分子工具是探針；從個體水平上檢測轉基因水稻是否有抗性及抗性程度的方法是轉基因水稻植株分別種植在干旱程度（或含水量）不同的田地里（觀察其生長狀況以檢測其是否有抗性及抗性程度）． 所以答案是：（1）人工合成（2）PCR 　5（3）啟動子pRD29A、PYL9基因、終止子 需要（4）植物組織培養(yǎng)（5）DNA分子探針/基因探針 轉基因水稻植株分別種植在干旱程度（或含水量）不同的田地里（觀察其生長狀況以檢測其是否有抗性及抗性程度）
【考點精析】通過靈活運用基因工程的原理及技術，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術即可以解答此題．