Question

(12分) 利用轉(zhuǎn)基因山羊乳腺反應(yīng)器可生產(chǎn)人促紅細(xì)胞生成素(EPO)，獲得轉(zhuǎn)基因山羊的過程如下圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）在已知EPO基因的上游和下游堿基序列的前提下，過程①獲取目的基因的方法為 。

（2）在過程②中，應(yīng)用 切割目的基因和質(zhì)粒，使其具有相同的黏性末端。EPO基因表達(dá)載體上要具備 等調(diào)控元件，以便完成EPO基因的轉(zhuǎn)錄。

（3）在過程③中，用 法將EPO表達(dá)載體移入雄原核中。在過程⑤前，需對囊胚期的細(xì)胞進(jìn)行鑒定：一是用 法鑒定EPO基因表達(dá)產(chǎn)物；二是用 法鑒定囊胚的性別，選用雌性胚胎。

（4）為獲得更多轉(zhuǎn)基因山羊，一方面可對供體母山羊注射 促進(jìn)超數(shù)排卵。另一方面，可對早期胚胎進(jìn)行分割移植，胚胎分割的關(guān)鍵是 。

Answer 1

（除注明外，每空1分，共12分）

（1）PCR擴(kuò)增（2分） （2）同一種限制酶 啟動子和終止子（2分）

（3）顯微注射法 抗原-抗體雜交（2分） DNA分析（2分）

（4）促性腺激素 將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均分

【解析】

試題分析：（1）依題意，可以依據(jù)已知EPO基因的上游和下游堿基序列合成引物，進(jìn)而利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。

（2）過程②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建。在構(gòu)建基因表達(dá)載體時，應(yīng)使用同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，使其具有相同的黏性末端。啟動子位于基因的首端，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，終止子是轉(zhuǎn)錄終止的信號，所以EPO基因表達(dá)載體上要具備啟動子和終止子等調(diào)控元件，以便完成EPO基因的轉(zhuǎn)錄。

（3）過程③是將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞的過程，該過程常采用顯微注射法。EPO基因表達(dá)產(chǎn)物的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，鑒定目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，用抗原-抗體雜交技術(shù)；囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤，對胎兒的發(fā)育沒有多大影響，而且與將來發(fā)育成胎兒各種組織的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)都來自同一個受精卵，基因型是相同的，因此鑒定囊胚的性別，應(yīng)取滋養(yǎng)層做DNA分析性別鑒定。

（4）做超數(shù)排卵處理，應(yīng)對供體母山羊注射促性腺激素；對早期胚胎進(jìn)行分割時，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。

考點：本題考查基因工程、胚胎移植、胚胎分割的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。