Question

pBR322質(zhì)粒是基因工程中經(jīng)常選用的工R具，如圖Ⅰ所示。

Ⅰ．目的基因如果插入質(zhì)粒的某抗性基因中，將使該基因失活。為了檢查運載體是否導入原本無Amp^r和Tet^r的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖Ⅱ的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖Ⅲ的結(jié)果（空圈表示與Ⅱ?qū)φ諢o菌落的位置）。

（1）．pBR322質(zhì)粒在基因工程中的作用是________。

（2）．下圖是pBR322質(zhì)粒上被某種酶識別的一段特定序列。a處被切割后，產(chǎn)生的暴露出來的單鏈堿基序列是________。如果要從生物細胞中分離目的基因，首先需要進行基因定位，然后再用上述酶切割。將目的基因與質(zhì)粒連接起來的酶作用于圖中的________處。

（3）．根據(jù)用途，上述I的敘述中所用培養(yǎng)基屬于________，與圖Ⅲ空圈相對應的圖Ⅱ中的菌落表現(xiàn)型是________，由此說明目的基因插入了________中。

Ⅱ．下面是pBR322質(zhì)粒的部分堿基序列，所編碼蛋白質(zhì)的氨基酸序列為“甲硫氨酸－精氨酸－谷氨酸－丙氨酸－天冬氨酸－纈氨酸…”（甲硫氨酸的密碼子AUG也是起始密碼子）。

則：①、②兩單鏈作為轉(zhuǎn)錄模板鏈的是________（填序號），該鏈轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA順序是AUG________；如圖中箭頭所指堿基對G／C缺失，該基因相應片段編碼的氨基酸序列為________。

Answer 1

答案：
解析：

　�、瘢�（1）作為運載體

　�。�2）．－TGCA或ACGT－　a

　　（3）．選擇培養(yǎng)基　能抗氨芐青霉素，但不能抗四環(huán)素　Tetr

　　Ⅱ．②CGGGAGGCGGAUGUC……

　　甲硫氨酸－精氨酸－谷氨酸－精氨酸－甲硫氨酸…