Question

6．科學(xué)家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以再相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)．質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)．圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關(guān)步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞．請(qǐng)據(jù)圖作答：

（1）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，為了避免目的基因和質(zhì)粒在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，此實(shí)例應(yīng)該選用限制酶PstⅠ、SmaⅠ對(duì)含魚抗凍蛋白基因的DNA、質(zhì)粒進(jìn)行切割．
（2）圖中③④過程中，需要向培養(yǎng)基中加入起調(diào)節(jié)作用的物質(zhì)是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素（或植物激素）．
（3）愈傷組織常用做誘變育種的理想材料，理由是愈傷組織是一群具有分裂能力的細(xì)胞，DNA在細(xì)胞分裂時(shí)結(jié)構(gòu)最不穩(wěn)定，最容易發(fā)生基因突變．
（4）經(jīng)組織培養(yǎng)篩選獲得的番茄葉綠素突變體，其葉綠素a與葉綠素b的比值顯著大于對(duì)照組，葉綠素總量不變．某同學(xué)用①④（填序號(hào)：①綠色；②紅色；③藍(lán)紫色；④黃色）光照射突變體和對(duì)照組葉片，檢測(cè)到兩者光合作用放氧速率差異不大．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示表示抗凍番茄的培育過程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；②表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；③表示脫分化過程；④表示再分化過程．

解答 解：（1）含目的基因的外源DNA分子上有PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，但用AluⅠ切割會(huì)破壞目的基因，單獨(dú)用PstⅠ切割會(huì)導(dǎo)致目的基因或質(zhì)粒自身環(huán)化，也會(huì)導(dǎo)致目的基因和載體的黏性末端發(fā)生任意連接，因此為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用限制酶PstⅠ、SmaⅠ分別對(duì)含魚抗凍蛋白基因的DNA、質(zhì)粒進(jìn)行切割．
（2）圖中③是脫分化過程，④是再分化過程，這兩個(gè)過程都需要向培養(yǎng)基中加入生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素．
（3）愈傷組織是一群具有分裂能力的細(xì)胞，DNA在細(xì)胞分裂時(shí)結(jié)構(gòu)最不穩(wěn)定，最容易發(fā)生基因突變，因此愈傷組織常用做誘變育種的理想材料．
（4）葉綠素主要吸收紅光和藍(lán)紫光，對(duì)黃色光吸收較少，對(duì)綠色光吸收最少，因此用綠色和黃色光照射突變體和對(duì)照組葉片，檢測(cè)到兩者光合作用放氧速率差異不大．
故答案為：
（1）PstⅠ、SmaⅠ
（2）生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素（或植物激素）
（3）愈傷組織是一群具有分裂能力的細(xì)胞，DNA在細(xì)胞分裂時(shí)結(jié)構(gòu)最不穩(wěn)定，最容易發(fā)生基因突變
（4）①④

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟；識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過程、原理及條件，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．