Question

【題目】PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過程，請據(jù)圖分析回答下列問題。

（1）加熱使DNA雙鏈氫鍵打開，在細(xì)胞中是在____________的作用下使此鍵斷裂。

（2）當(dāng)溫度降低時，兩種引物與兩條單鏈DNA結(jié)合，在______酶的作用下，從引物_______端沿模板延伸，最終合成2個DNA分子，此過程中加入四種脫氧核苷酸的目的是__________。

（3）PCR技術(shù)的必要條件，除了模塊、原料、ATP、酶以外，至少還需要適宜的溫度和____________。

（4）PCR—般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為__________、__________和_________三個步驟。

Answer 1

【答案】 解旋酶 Taq DNA聚合酶 3＇ 既是原料，又能提供能量 酸堿度 變性 復(fù)性 延伸

【解析】試題分析：本題考查DNA分子的復(fù)制、PCR技術(shù)等知識，要求學(xué)生識記PCR技術(shù)的原理及具體過程；識記DNA分子復(fù)制的過程，掌握DNA半保留復(fù)制中的相關(guān)計算，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。PCR過程包括：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

（1）PCR擴增中，雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開，而在細(xì)胞中，氫鍵是在解旋酶的作用下斷裂的。

（2）當(dāng)溫度降低時，兩種引物與兩條單鏈DNA結(jié)合，在Taq DNA聚合酶的作用下，從引物的3＇端沿模板延伸，最終合成2個DNA分子，此過程中加入四種脫氧核苷酸的目的是既是原料，又能提供能量。

（3）PCR技術(shù)的必要條件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少還需要適宜的溫度和酸堿度。

（4）PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、延伸三個步驟。