Question

以下為人工合成reAnti基因，轉入豬成纖維細胞，做成轉基因克隆豬的培育過程示意圖，請據圖回答：

（1）構建的重組質粒除了要有reAnti基因和標記基因外，還要有

 

和

 

．
（2）過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞后，要通過DNA分子雜交技術，來檢測reAnti基因是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的

 

上．
（3）從豬中取胎兒成纖維細胞，用

 

處理，然后進行分散培養(yǎng)．培養(yǎng)時，將培養(yǎng)瓶置于含

 

的混合氣體培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)．
（4）去核前的卵母細胞應培養(yǎng)到

 

期．其去核后與成纖維細胞通過電刺激后融合，形成重組細胞，再利用物理或化學方法刺激，使之完成細胞

 

，在體外培養(yǎng)成重組早期胚．
（5）在進行過程⑦操作前，應用激素對受體母豬進行

 

處理．

Answer 1

考點：基因工程的應用

專題：

分析：分析題圖：①是獲取目的基因的過程；②是基因表達載體的構建過程；③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞的過程；④采用顯微技術去核；⑤是核移植過程；⑥動物細胞培養(yǎng)過程；⑦是胚胎移植過程；⑧是妊娠形成轉基因克隆豬的過程．

解答： 解：（1）基因表達載體包括目的基因、標記基因、啟動子和終止子，所以構建的重組質粒除了要有reAnti基因和標記基因外，還要有啟動子和終止子．
（2）目的基因（reAnti基因）是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的染色體上，可用DNA分子雜交技術進行檢測．
（3）動物細胞培養(yǎng)時，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織，使動物細胞分散成單個細胞．動物細胞培養(yǎng)時要放入到95%的空氣（保證細胞代謝）和5%CO₂（調節(jié)培養(yǎng)液的PH）培養(yǎng)箱中．
（4）去核前的卵母細胞應培養(yǎng)到減數第二次分裂中期才成熟，其去核后與成纖維細胞通過電刺激后融合，形成重組細胞，再利用物理或化學方法刺激，使之完成細胞分裂和發(fā)育，在體外培養(yǎng)成重組早期胚．
（5）在進行胚胎移植前，需要對受體進行同期發(fā)情處理，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境．
故答案：（1）（Anti基因的）啟動子  終止子  
（2）染色體DNA
（3）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）     95%空氣加5%CO₂
（4）MII中  分裂和發(fā)育  
（5）同期發(fā)情

點評：本題考查基因工程、動物細胞培養(yǎng)和核移植的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯(lián)系，形成知識網絡的能力；能運用所學知識，解決生物學問題的能力．