Question

海洋中的發(fā)光細菌具獨特的生理特性，可作為環(huán)境監(jiān)測的指標生物．
I．（1）使用

 

法（答二種），可在固體培養(yǎng)基上獲得單菌落，純化發(fā)光菌株．
（2）細菌這類微生物在基因工程中有重要應用，試列舉其中一項．

 

II．現(xiàn)利用發(fā)光細菌對海水重金屬污染程度進行生物毒性監(jiān)測，請完善下列實驗設計并回答問題：
實驗原理：細菌代謝正常時，發(fā)光強度穩(wěn)定；當重金屬影響到其代謝時，發(fā)光會受到抑制，抑制程度用抑光率（發(fā)光被抑制的百分率）表示．
實驗材料：發(fā)光菌懸液、可能受重金屬污染的待測海水水樣、3%NaCl溶液、熒光分光光度計（用于測定細菌發(fā)光強度）、試管等．
（1）實驗步驟：按下表配制待測海水樣品稀釋液．

組   別	1	2	3	4	5
3%NaCl溶（mL）		4.74	4.49	4.24	3.99
海水樣品（mL）		0.25	0.50	0.75	1.00
發(fā)光菌懸液（mL）		0.01	0.01	0.01	0.01
混合液中海水濃度（%）		0.05	0.10	0.15	0.20

請完善實驗步驟：
①1號試管中應加入：3%NaCl溶液、海水樣品、發(fā)光菌懸液分別為

 

mL．
②各試管靜置15min后，

 

．
（2）計算相對抑光率：按照公式T%=

 

計算各組相對抑光率．
（3）如果測得上述各組相對抑光率如下：

組別	1	2	3	4	5
相對抑光率（%）	0	6	13	17	23

①請繪制海水濃度對相對抑光率影響的曲線．
②根據結果可以判斷待測海水樣品

 

．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),微生物的利用

專題：

分析：閱讀題干可知，本題是通過實驗利用發(fā)光細菌對海水重金屬污染程度進行生物毒性監(jiān)測，根據問題涉及的具體內容梳理相關知識點，然后分析綜合進行解答．

解答： 解：Ⅰ（1）在固體培養(yǎng)基上獲得單菌落的接種方法是平板劃線法、稀釋涂布平板法．
（2）細菌在基因工程中有重要應用如提供工具酶、提供目的基因、提供目的基因的載體、作為受體細胞、提供用于發(fā)酵的工程菌等．
Ⅱ（1）由題意可知本題實驗的目的是對海水重金屬污染程度進行生物毒性監(jiān)測，細菌代謝正常時，發(fā)光強度穩(wěn)定；當重金屬影響到其代謝時，發(fā)光會受到抑制．
①分析表格數(shù)據可知，1號試管是對照實驗，實驗設置應遵循單因子變量的原則，所以應加入：3%NaCl溶液、海水樣品、發(fā)光菌懸液分別為4.99、0、0.01mL．
②各試管靜置15min后，利用熒光分光光度計測定各試管發(fā)光強度．
（2）計算相對抑光率的計算公式是（對照組發(fā)光強度-實驗組發(fā)光強度）/對照組發(fā)光強度×100%．
（3）①注意標出原點、縱軸、橫軸的含義．
②應選表格數(shù)據可知，混合液中海水濃度不同抑光率不同，海水濃度越大抑光率越大，表明海水樣品已受到金屬污染．
故大案應為：
I（1）平板劃線法、稀釋涂布平板法
（2）提供工具酶、提供目的基因、提供目的基因的載體、作為受體細胞、提供用于發(fā)酵的工程菌（答對其中一項即可）．
II（1）①4.99、0、0.01            ②利用熒光分光光度計測定各試管發(fā)光強度
（2）（對照組發(fā)光強度-實驗組發(fā)光強度）/對照組發(fā)光強度×100%
（3）①如圖
②受到重金屬污染

點評：本題是知識點是分離微生物常用的接種方法，細菌在基因工程中的應用，實驗設計的原則，主要考查學生完善實驗步驟，處理分析實驗結果獲取結論的能力和利用實驗數(shù)據進行繪圖的能力．