Question

【題目】結(jié)核分枝桿菌（M.tuberculosis），是引起結(jié)核病的病原菌。建國前結(jié)核病死亡率達200-300人/10萬，建國后開展了群防群治，兒童普遍接種卡介苗，其發(fā)病率和死亡率大為降低。臨床用藥前，有時需要做細菌相關(guān)耐藥實驗。請回答下列相關(guān)問題：

（1）適于結(jié)核桿菌生長的培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分一般含有___________________以及水和無機鹽，除了提供以上幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)外，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及___________的要求。

（2）若對結(jié)核桿菌進行分離計數(shù)，需要將含有結(jié)核桿菌的菌液采用____________法接種于經(jīng)過_________滅菌后冷卻的固體培養(yǎng)基表面，這種接種方法的好處是___________。所有操作都應在___________附近進行。

（3）將分別含等劑量不同抗生素的相同大小的小濾紙圓片均勻置于該平板上的不同位置，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，結(jié)果濾紙片周圍均出現(xiàn)透明圈，這說明結(jié)核桿菌對實驗所用抗生素表現(xiàn)為_____________（填“敏感”或“不敏感”）。

（4）接種卡介苗，可以降低結(jié)核病的發(fā)病率和死亡率，所用的卡介苗屬于_________（填“抗原”、“抗體”）。

Answer 1

【答案】碳源、氮源 氧氣 稀釋涂布平板 高壓蒸汽 可得到單個的菌落（或可將菌群分散成單個的細菌） 酒精燈火焰 敏感 抗原

【解析】

1、培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。由于微生物具有不同的營養(yǎng)類型，對營養(yǎng)物質(zhì)的要求也各不相同，加之實驗和研究的目的不同，所以培養(yǎng)基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營養(yǎng)角度分析，培養(yǎng)基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機鹽、生長素以及水分等。另外，培養(yǎng)基還應具有適宜的pH值、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

2、稱藥品→溶解→調(diào)pH值→融化瓊脂→過濾分裝→包扎標記→滅菌→擺斜面或倒平板。

3、卡介苗是用于預防結(jié)核病的疫苗。接種卡介苗后能使機體對結(jié)核分枝桿菌產(chǎn)生特異性的免疫力，可阻止該病菌在人體內(nèi)的繁殖、播散，可以預防結(jié)核性腦膜炎和粟粒性結(jié)核

4、微生物接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，前者只能得到單菌落用于純化菌種，不能用于計數(shù)，而后者不僅能得到單菌落而且還可進行活菌計數(shù)。

（1）由分析可知：培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分應含有碳源、氮源以及水和無機鹽，除提供以上幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)外，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

（2）由于稀釋涂布平板法不僅能得到單菌落而且還可進行活菌計數(shù)，故要對結(jié)核桿菌進行分離計數(shù)，需采用稀釋涂布平板法接種于固體培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)基滅菌的方法通常采用高壓蒸汽滅菌法，冷卻后可用稀釋涂布平板法將結(jié)核桿菌的菌液經(jīng)梯度稀釋后進行接種，這種接種方法的好處是可得到單個的菌落（或可將菌群分散成單個的細菌）。由于酒精燈火焰附近為無菌區(qū)，為了避免雜菌污染，故接種時在在酒精燈火焰附近進行。

（3）由于濾紙圓片上含有不同抗生素，將圓片置于該平板上的不同位置，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間之后，在濾紙片周圍均出現(xiàn)透明圈，說明抗生素抑制或消滅了結(jié)核桿菌，故這說明結(jié)核桿菌對實驗所用抗生素表現(xiàn)為敏感。

（4）卡介苗是減毒的結(jié)核桿菌，能刺激機體發(fā)生特異性免疫反應，使機體產(chǎn)生抗體和記憶細胞，從而起到了預防感染結(jié)核桿菌的作用，可以降低結(jié)核病的發(fā)病率和死亡率，故此卡介苗屬于抗原。