Question

【題目】為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因 C，擬將其與質(zhì)粒重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。下列操作與實驗?zāi)康牟环�的�?/span>()

A.用限制性核酸內(nèi)切酶 EcoR Ⅰ和連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒

B.在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細胞

C.用含基因 C 的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將基因 C 導(dǎo)入細胞

D.用分子雜交方法檢測基因 C 是否整合到菊花染色體上

Answer 1

【答案】B

【解析】

1、基因工程的基本工具：分子手術(shù)刀”--限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、“分子縫合針”--DNA連接酶、“分子運輸車”--載體。

2、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)�入受體細胞，④目的基因的檢測與鑒定。

3、標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。常用的標記基因是抗生素抗性基因。

（1）首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子雜交技術(shù)；

（2）其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標記的目的基因作探針與 mRNA雜交；

（3）最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取 蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行抗原-抗體雜交；

（4）有時還需進行個體生物學(xué)水平的鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。

A、據(jù)圖分析可知，在目的基因的兩端、啟動子和終止子之間都有限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ的切割位點，因此可以用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ切割目的基因和運載體，之后再用DNA連接酶連接形成基因表達載體，A正確；

B、圖2中顯示標記基因時潮霉素抗性基因，應(yīng)該在培養(yǎng)基中添加潮霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細胞，B錯誤；

C、將目的基因?qū)�入到植物細胞，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，可以將目的基因C導(dǎo)入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA段，之后再用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)�入細胞中染色體上的DNA上，C正確；

D、要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子雜交技術(shù)，D正確。

故選B。