Question

【題目】下圖是南通某中學(xué)生物興趣小組進(jìn)行的DNA粗提取實(shí)驗(yàn)，其中SDS(—種表面活性劑)除了能瓦解細(xì)胞膜和核膜，還能與脂質(zhì)和蛋白質(zhì)結(jié)合。當(dāng)SDS遇到鉀離子時(shí)，鉀離子可以置換SDS中的鈉離子，產(chǎn)生不溶于水的PDS沉淀。請(qǐng)回答下列問題：

（1）實(shí)驗(yàn)中，向剪碎的豬肝中加入食鹽的主要作用是_______。將豬肝勻漿放入65℃水浴鍋中水浴lOmin以除去部分雜質(zhì)的主要實(shí)驗(yàn)原理是________________。

（2）方法一的步驟①中加入洗滌劑的作用是_________。方法三的步驟③中，離心后應(yīng)取____________。

（3）方法一、二獲得的絮狀物均帶黃色，從DNA在細(xì)胞中的存在形式分析，雜質(zhì)分子最可能是________，可用___________試劑鑒定。

（4）要比較三種方法獲得的絮狀物中DNA含量，請(qǐng)寫出實(shí)驗(yàn)思路：_________________________________。

Answer 1

【答案】 溶解DNA 蛋白質(zhì)在65℃高溫下會(huì)變性而DNA能耐受這一溫度 瓦解細(xì)胞膜和核膜 上清液 蛋白質(zhì) 雙縮脲 分別取等量的三種絮狀物，并用等量的2mol/LNaCl溶液溶解；再向各試管中加入等量的二苯胺試劑并水浴加熱；比較三支試管中藍(lán)色的深淺

【解析】試題分析：根據(jù)題干信息分析，SDS是—種表面活性劑，既可以瓦解細(xì)胞膜和核膜，還可以與脂質(zhì)和蛋白質(zhì)結(jié)合；其含有的鈉離子可以被鉀離子置換，進(jìn)而產(chǎn)生不溶于水的PDS沉淀。

（1）在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，向剪碎的豬肝中加入食鹽可以溶解DNA ；蛋白質(zhì)在65℃高溫下會(huì)變性，而DNA能耐受這一溫度，因此將豬肝勻漿放入65℃水浴鍋中水浴lOmin可以除去蛋白質(zhì)類的雜質(zhì)。

（2）方法一的步驟①中加入洗滌劑，可以瓦解細(xì)胞膜和核膜；方法三的步驟③中，SDS在氯化鉀溶液中形成不溶于水的PDS沉淀，又因?yàn)镾DS能瓦解細(xì)胞膜、核膜，并能與脂質(zhì)和蛋白質(zhì)結(jié)合，應(yīng)該將該沉淀物除去，因此離心后應(yīng)該取上清液。

（3）細(xì)胞中的DNA主要存在于染色體上，染色體的主要成分是DNA和蛋白質(zhì)，因此該雜質(zhì)最可能是蛋白質(zhì)，可以用雙縮脲試劑進(jìn)行鑒定。

（4）比較三種方法獲得的絮狀物中DNA含量，可以利用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定，實(shí)驗(yàn)思路如下：分別取等量的三種絮狀物，并用等量的2mol/LNaCl溶液溶解；再向各試管中加入等量的二苯胺試劑并水浴加熱；比較三支試管中藍(lán)色的深淺。