Question

【題目】回答下列有關(guān)生物技術(shù)實踐的問題：

（1）某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基配方為：蛋白胨10克、葡萄糖5克、蔗糖5 克、KH2PO42克、顯色劑（伊紅美藍）0．2g、瓊脂12克，將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL。根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于________________培養(yǎng)基，若要分離能分解尿素的細(xì)菌，需對培養(yǎng)基作出的兩項調(diào)整是___________________________。

（2）對同一濃度的菌液，分別用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)和涂布分離法計數(shù)， 若不存在實驗誤操作，則前者的數(shù)量______（填“多于”、“等于”或“小于”） 后者，其原因是_______。

（3）某科研工作者用特殊的化學(xué)物質(zhì)將酶包裹，遇水后包裹層很快溶解，釋放出來的酶迅速發(fā)揮催化作用。請說明這是否運用了酶的固定化技術(shù)及其理由：_____________。

Answer 1

【答案】鑒別 將蛋白胨換成尿素；瓊脂換成瓊脂糖 多于 前者將死菌、活菌一起計數(shù)，后者只計活菌；后者存在多個菌形成一個菌落的情況 未運用 因為酶未固定在不溶于水的載體上，也不能重復(fù)利用

【解析】

1、微生物培養(yǎng)基按用途分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，按物理性質(zhì)分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。

2、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

3、固定化酶技術(shù)的應(yīng)用：①固定化酶：固定化酶是指用物理學(xué)或化學(xué)的方法將酶與固相載體結(jié)合在一起形成的仍具有酶活性的酶復(fù)合物。在催化反應(yīng)中，它以固相狀態(tài)作用于底物，反應(yīng)完成后，容易與水溶性反應(yīng)物和產(chǎn)物分離，可被反復(fù)使用。②制備固定化酶：目前，制備固定化酶的方法主要有吸附法、交聯(lián)法、包埋法等。吸附法的顯著特點是工藝簡便且條件溫和，在生產(chǎn)實踐中應(yīng)用廣泛；交聯(lián)法是利用多功能試劑進行酶與載體之間的交聯(lián)，在酶和多功能試劑之間形成共價鍵，從而得到三維的交聯(lián)網(wǎng)架結(jié)構(gòu)；包埋法是將酶包埋在能固化的載體中。

（1）根據(jù)題意分析，該培養(yǎng)基中含有顯色劑（伊紅-美藍），可用于鑒別大腸桿菌，應(yīng)該屬于鑒別培養(yǎng)基。分離能分解尿素的細(xì)菌時應(yīng)該以尿素為唯一氮源，因此若要分離能分解尿素的細(xì)菌，需要將培養(yǎng)基中的蛋白胨換成尿素，瓊脂換成瓊脂糖。

（2）對同一濃度的菌液，分別用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)和涂布分離法計數(shù)，由于前者將死菌、活菌一起計數(shù)，而后者存在多個產(chǎn)脲酶菌形成一個菌落的情況且只計數(shù)活菌，所以前者的數(shù)量多于后者。

（3）根據(jù)題意分析，由于只是用特殊的化學(xué)物質(zhì)將脲酶包裹，其中的酶并未固定在不溶于水的載體上，也不能重復(fù)利用，所以沒有利用酶的固定化技術(shù)。