Question

13．基因治療是指將外源正�；�因?qū)�入靶�?xì)胞，以糾正或補(bǔ)償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達(dá)到治療的目的．干擾素基因缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟淋巴細(xì)胞，科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失的小鼠進(jìn)行了基因治療．請回答：
（1）為使干擾素基因在小鼠細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間．
（2）將干擾素基因?qū)�入ES細(xì)胞的方法是顯微注射技術(shù)，采用DNA分子雜交可以鑒定目的基因是否插入到受體細(xì)胞染色體DNA分子上，再將能正常表達(dá)干擾素的細(xì)胞轉(zhuǎn)入到小鼠體內(nèi)，這種治療方法稱為體外基因治療．導(dǎo)入ES細(xì)胞而不是導(dǎo)入上皮細(xì)胞是因?yàn)镋S細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的全能性．
（3）干擾素基因缺失的小鼠易患某種細(xì)菌導(dǎo)致的肺炎，引起這種現(xiàn)象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴細(xì)胞，降低了小鼠免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能．
（4）用于基因治療的基因有三類，一類是把正�；�因?qū)�入有基因缺陷的�?xì)胞中，以表達(dá)出正常性狀來治療，第二類是反義基因，即通過產(chǎn)生的mRNA分子與病變基因產(chǎn)生的mRNA進(jìn)行互補(bǔ)結(jié)合，來阻斷非正常蛋白質(zhì)的合成；第三類是編碼可以殺死癌細(xì)胞的蛋白酶基因．

Answer 1

分析 1、基因表達(dá)載體包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因．啟動(dòng)子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端
2、目的基因的檢測與鑒定：
（1）分子水平上的檢測：
①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；
②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；
③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．
（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
3、反義基因，即通過產(chǎn)生的mRNA分子，與病變基因產(chǎn)生的mRNA進(jìn)行互補(bǔ)，來阻止合成非正常蛋白質(zhì)．

解答 解：（1）基因表達(dá)載體包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因．啟動(dòng)子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端．因此，為使干擾素基因在小鼠細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間．
（2）在基因工程中，受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，因此將干擾素基因?qū)�入ES細(xì)胞的方法是顯微注射技術(shù)．檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因的方法是DNA分子雜交技術(shù)；將能正常表達(dá)干擾素的細(xì)胞轉(zhuǎn)入到小鼠體內(nèi)，這種治療方法稱為體外基因治療；ES細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的全能性．
（3）小鼠缺少成熟的淋巴細(xì)胞，降低了患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能．
（4）反義基因，即通過產(chǎn)生的mRNA分子，與病變基因產(chǎn)生的mRNA進(jìn)行互補(bǔ)，來阻止合成非正常蛋白質(zhì)．
故答案為：
（1）啟動(dòng)子    終止子
（2）顯微注射技術(shù)  DNA分子雜交    體外基因治療    發(fā)育的全能性
（3）防衛(wèi)
（4）mRNA

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程、免疫系統(tǒng)等相關(guān)知識(shí)，要求考生熟記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，意在考查考生的識(shí)記能力和應(yīng)用能力，屬于容易題．但是掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．