Question

羊絨素有“軟黃金”之稱，內(nèi)蒙古絨山羊和遼寧絨山羊是我國的兩大產(chǎn)絨品種．我國生物學家運用現(xiàn)代生物技術培育出了轉基因絨山羊，其過程如圖1所示：

（1）在遼寧絨山羊細胞中獲取的IGFI基因在導入胚胎干細胞之前須

 

，這是基因工程操作的核心步驟，若該過程使用的質粒是雙鏈閉合環(huán)狀的DNA分子，用兩種識別序列不同的限制酶M和N切割（識別序列和切割位點如圖2），通過凝膠電泳分離分析得下表．

使用限制酶	酶切結果（單位：Kb）
酶M	1.0、5.0、10.0
酶M+酶N	1.0、2.0、3.0、4.0、6.0

則：①在該質粒中，M酶與N酶的切割位點分別有

 

個．
②M酶與N酶切出的能相互粘連的末端在酶的作用下相互連接，請將連接的結果表示出來：

 

；連接后的序列是否可以用M酶、N酶進行切割：

 

．
（2）胚胎干細胞（ES）可由囊胚的

 

分離培養(yǎng)獲得，轉基因胚胎干細胞培養(yǎng)過程中，須保持培養(yǎng)箱中含有5%的CO₂的目的是

 

．所配制的培養(yǎng)液除了含有各種營養(yǎng)成分，滿足適宜的溫度和酸堿性外，還應注意調(diào)節(jié)培養(yǎng)的

 

，否則將影響細胞的正常生命活動．
（3）干細胞經(jīng)擴大培養(yǎng)誘導分化為早期胚胎，隨后即可植入經(jīng)

 

處理的代孕母羊體內(nèi)．
（4）請列舉至少兩種轉基因克隆絨山羊培育過程中采用的現(xiàn)代生物技術：

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,動物細胞核移植技術

專題：

分析：1、根據(jù)題意，質粒是環(huán)狀DNA分子，酶M將質粒切割成三個DNA分子片段，所以酶M的切割位點有3個．酶M和酶N共切割成5個片段，所以酶N的切割位點是2個．
2、由圖2可知，酶M和酶N切割后的形成的黏性末端相同，故兩者的末端可相互連接．

解答： 解：（1）基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建．
①由分析可知，M酶的切割位點是3個，M酶的切割位點是2個．
②由圖可知，M酶與N酶切出的能相互粘連的末端在酶的作用下相互連接形成或，連接后的堿基序列與酶M或酶N的切割位點都不相同，故不能M酶或N酶切割．
（2）胚胎干細胞可由囊胚的內(nèi)細胞團分離培養(yǎng)獲得．動物細胞培養(yǎng)過程中二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液的PH．配制的培養(yǎng)液要滿足營養(yǎng)、適宜的溫度、PH、滲透壓等條件．
（3）胚胎移植過程需要對代孕母羊做同期發(fā)情處理．
（4）由圖可知，轉基因克隆絨山羊培育過程中采用的基因工程、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術．
故答案為：
（1）構建基因表達載體（構建重組DNA分子）
①3、2    ②   或       否
（2）內(nèi)細胞團   維持培養(yǎng)液的PH      濃度（或滲透壓）   　
（3）同期發(fā)情
（4）基因工程、動物細胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植

點評：本題考查胚胎工程相關知識，能從課外材料中獲取相關的生物學信息，并能運用這些信息，結合所學知識解決相關的生物學問題．