Question

1．毛角蛋白Ⅱ型中間絲（ KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)，獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程如圖．

（1）過程①中，最常用的運(yùn)載工具是質(zhì)粒，所需的酶是限制酶和DNA連接酶．
（2）在過程②中，用胰蛋白酶處理，可將皮膚組織塊分散成單個成纖維細(xì)胞．在培養(yǎng)過程中，將成纖維細(xì)胞置于5% CO₂的氣體環(huán)境中，CO₂的作用是維持培養(yǎng)基的pH．
（3）在過程③中，需用促性腺激素處理以獲得更多的卵（母）細(xì)胞，成熟的卵（母）細(xì)胞在進(jìn)行核移植前需做去核處理．
（4）在胚胎移植前，通過胚胎分割技術(shù)可獲得較多胚胎，實(shí)施該技術(shù)的最佳時期是桑椹胚或囊胚時期．
（5）判斷目的基因是否在受體細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測．

Answer 1

分析 解答本題首先讀懂圖解，圖示過程為利用基因工程技術(shù)獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的過程．圖中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，一般將目的基因與運(yùn)載體利用限制酶和DNA連接酶構(gòu)成重組質(zhì)粒；過程②表示利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)受體細(xì)胞；過程③為通過超數(shù)排卵的方法獲得更多的卵細(xì)胞．

解答 解：（1）基因工程中，運(yùn)載工具包括質(zhì)粒、噬菌體及動植物病毒等，其中質(zhì)粒是主要運(yùn)載工具；①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，首先需要限制酶切割含有目的基因的DNA和運(yùn)載體DNA，再用DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體形成重組質(zhì)粒．
（2）胰蛋白酶可將組織塊分散成單個細(xì)胞；動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要一定的氣體環(huán)境（95%氧氣和5%二氧化碳），其中5%CO₂的作用是維持培養(yǎng)基的pH．
（3）要得到更多的卵（母）細(xì)胞需用促性腺激素對動物進(jìn)行超數(shù)排卵處理；成熟卵（母）細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行去核處理，以保證克隆后代的遺傳性狀主要來自于供體核．
（4）在胚胎移植時，可通過胚胎分割技術(shù)獲得更多的胚胎，實(shí)施該技術(shù)的最佳時期是桑椹胚或囊胚時期．
（5）判斷目的基因是否在受體細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測是否已轉(zhuǎn)錄出mRNA．
故答案為：
（1）質(zhì)粒   限制酶和DNA連接酶
（2）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶 ） 維持培養(yǎng)基的pH
（3）促性腺激素    去核
（4）胚胎分割   桑椹胚或囊胚  
（5）分子雜交

點(diǎn)評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因山羊培育過程圖，考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記所列知識要點(diǎn)，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．