Question

13．白花蛇舌草是我國(guó)民間常用的中草藥，科學(xué)工作者用RPMI-1640培養(yǎng)基配制出不同濃度的白花蛇舌草提取物（HDE）工作液，分別處理人白血病細(xì)胞株（K562），測(cè)得線粒體內(nèi)膜跨膜電位的變化如圖1，測(cè)得凋亡抑制基因Survivin和原癌基因Bcl-2表達(dá)的變化情況如圖2．

（1）K562細(xì)胞是由于原癌基因發(fā)生突變，導(dǎo)致正常細(xì)胞的生長(zhǎng)和分裂失控而變成癌細(xì)胞．
（2）圖1中HDE處理48h后K562細(xì)胞內(nèi)線粒體內(nèi)膜跨膜電位下降最顯著．跨膜電位下降影響線粒體的功能，導(dǎo)致ATP合成停止，并釋放調(diào)亡誘導(dǎo)因子，最終引起細(xì)胞的凋亡或死亡．
（3）收集用HDE處理的K562細(xì)胞中Survivin和Bcl-2的mRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成cDNA，再通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增cDNA，然后測(cè)定其含量，結(jié)果如圖2所示．其中對(duì)照組的處理是使用等量不含HDE的RPMI-1640培養(yǎng)基．β-Actin基因在各組織和細(xì)胞中的表達(dá)相對(duì)恒定，在PCR中的作用是對(duì)照．從圖2數(shù)據(jù)可知，用HDE處理2周的K562細(xì)胞中Survivin和Bcl-2的表達(dá)明顯低于未經(jīng)處理的細(xì)胞．
（4）綜上所述，HDE可能通過(guò)降低線粒體內(nèi)膜跨膜電位，抑制抗凋亡基因的表達(dá)，從而抑制K562白血病細(xì)胞增殖．
（5）如果白花蛇舌草沒(méi)有明顯的毒副作用，依據(jù)本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，用它制藥的最佳用量是使人體的血藥濃度達(dá)到12.8mL/L．

Answer 1

分析 分析圖1：圖中在每個(gè)時(shí)間內(nèi)隨著白花蛇舌草提取物濃度的增加，電位變化逐漸增加，同一白花蛇舌草提取物度下隨著時(shí)間的推移，電位變化先增加后減少，據(jù)此答題．

解答 解：（1）K562細(xì)胞是一種癌細(xì)胞，具有無(wú)限增值的特點(diǎn)，是細(xì)胞內(nèi)原癌基因發(fā)生突變，導(dǎo)致正常細(xì)胞的生長(zhǎng)和分裂失控而變成癌細(xì)胞．
（2）圖1中白花蛇舌草提取物HDE處理大約48 h后，K562細(xì)胞內(nèi)線粒體內(nèi)膜跨膜電位下降明顯．從而影響線粒體的功能，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)ATP 合成停止，并釋放調(diào)亡誘導(dǎo)因子，最終引起細(xì)胞的凋亡或死亡．
（3）實(shí)驗(yàn)組中獲得的mRNA在逆轉(zhuǎn)錄 酶的作用下，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程可用合成cDNA，然后通過(guò)PCR 技術(shù)擴(kuò)增cDNA，獲得大量的cDNA．其對(duì)照組使用的是等量不含HDE的RPMI-1640培養(yǎng)基．根據(jù)題意分析β-Actin基因在PCR中起對(duì)照作用．從圖2數(shù)據(jù)可知，用HDE處理2周的K562細(xì)胞中Survivin和Bcl-2的表達(dá)明顯低于未經(jīng)處理的細(xì)胞．
（4）根據(jù)以上分析控制HDE可能通過(guò)降低線粒體內(nèi)膜跨膜電位，抑制抗凋亡基因的表達(dá)，從而抑制K562白血病細(xì)胞增殖．
（5）圖中12.8效果最明顯，即用它制藥的最佳用量是使人體的血藥濃度達(dá)到12.8mL/L．
故答案為：
（1）原癌
（2）48      ATP
（3）逆轉(zhuǎn)錄    PCR   不含HDE的RPMI-1640培養(yǎng)基對(duì)照明顯低于
（4）降低線粒體內(nèi)膜跨膜電位  抑制
（5）12.8

點(diǎn)評(píng) 本題的知識(shí)點(diǎn)是探究癌細(xì)胞防治的機(jī)理，主要考查學(xué)生的識(shí)圖能力，評(píng)價(jià)并完善實(shí)驗(yàn)步驟，分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果獲取結(jié)論的能力和根據(jù)提供信息 進(jìn)行推理的能力．