Question

【題目】人血清白蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價(jià)值，只能從血漿中制備。如圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。請(qǐng)回答：

（1）獲取HSA基因的方法有______________、_____________、_____________。若需要獲得cDNA則首先需采集人的血液，提取血液中的_________。然后以cDNA為模板，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因。

（2）下圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向，請(qǐng)用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出標(biāo)出另一條引物的位置及擴(kuò)增方向。

______________

（3）啟動(dòng)子通常具有物種及組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體，需要選擇的啟動(dòng)子是_____________（填寫字母）。

A.人血細(xì)胞啟動(dòng)子 B.水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子 C.大腸桿菌啟動(dòng)子 D.農(nóng)桿菌啟動(dòng)子

（4）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中，需添加酚類物質(zhì)，其目的是_______________。農(nóng)桿菌中含有Ti質(zhì)粒，其上有一段TDNA，這段DNA的作用是_______________________。

（5）為證明rHSA具有醫(yī)用價(jià)值，須確認(rèn)rHSA與______________的生物學(xué)功能一致。

Answer 1

【答案】從基因文庫(kù)中獲取 PCR技術(shù)擴(kuò)增 人工合成 RNA(或mRNA) B 吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化 將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上 HSA

【解析】

基因工程的操作步驟：獲取目的基因（基因文庫(kù)、PCR、人工合成）；構(gòu)建基因表達(dá)載體（含標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、目的基因、復(fù)制原點(diǎn)等）；把目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法、鈣離子處理法）；目的基因的檢測(cè)和鑒定（分子水平和個(gè)體水平檢測(cè)，前者包括DNA分子雜交、分子雜交和抗原抗體雜交；后者如抗蟲抗病接種實(shí)驗(yàn)）。

（1）獲取HSA基因可以通過從基因文庫(kù)獲取、PCR擴(kuò)增、人工合成等方法獲取HSA基因。HSA只能在血漿中制備，故若需要獲得cDNA，則需要先提取血液中的RNA，通過反轉(zhuǎn)錄合成cDNA，再采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因。

（2）根據(jù)兩條鏈反向平行可知，另一條引物的結(jié)合位點(diǎn)應(yīng)該在下面一條鏈的右側(cè)，即。

（3）要讓目的基因在水稻的胚乳細(xì)胞中表達(dá)，需要在目的基因的前面加上水稻胚乳細(xì)胞基因的啟動(dòng)子。

綜上所述，ACD不符合題意，B符合題意。

故選B。

（4）常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入水稻�?xì)胞中，酚類物質(zhì)吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化。農(nóng)桿菌中含有Ti質(zhì)粒，其上有一段T-DNA，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上，故需要將目的基因插入到T-DNA上。

（5）rHSA是通過基因工程技術(shù)獲得的，可以通過比較rHSA與HSA的生物學(xué)功能是否一致，來確定rHSA的醫(yī)學(xué)價(jià)值。