Question

【題目】研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達(dá)的H蛋白在多種惡性 腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過(guò)量表達(dá)。抗H蛋白單克隆抗體能抑制過(guò)量表達(dá)H蛋白的乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，目前已成為有效的生物治療手段。

(1)選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)，是因?yàn)镠蛋白在成年個(gè)體的正常組織中________(填“低表達(dá)”或“高表達(dá)”)。H蛋白是一個(gè)跨膜蛋白，結(jié)構(gòu)如圖所示。制備免疫小鼠用的H蛋白(抗原)時(shí)，應(yīng)構(gòu)建________區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純。

(2)將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，取該小鼠的脾臟細(xì)胞與________細(xì)胞進(jìn)行融合，使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是________，細(xì)胞融合的原理是________。

(3)將融合細(xì)胞在________培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時(shí)間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，應(yīng)用抗原抗體雜交技術(shù)進(jìn)行_________檢測(cè)。經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。

(4)治療乳腺癌時(shí)，可單獨(dú)使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，殺死癌細(xì)胞。這充分體現(xiàn)了單克隆抗體________________的特點(diǎn)。

Answer 1

【答案】 低表達(dá) 胞外 骨髓瘤 PEG(或“聚乙二醇”) 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 選擇 抗體陽(yáng)性 特異性強(qiáng)(或“識(shí)別抗原部位專一”)

【解析】試題分析：本題考查單克隆抗體技術(shù)，考查對(duì)單克隆抗體制備流程的理解和識(shí)記。解答此題，應(yīng)明確單克隆抗體的制備原理和單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)。

(1) H蛋白在多種惡性腫瘤中過(guò)量表達(dá)，在成年個(gè)體的正常組織中低表達(dá)，因此看選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。H蛋白的胞外部分可被免疫系統(tǒng)識(shí)別，制備免疫小鼠用的H蛋白(抗原)時(shí)，應(yīng)構(gòu)建胞外區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純。

(2)將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，取該小鼠的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，使用PEG(或“聚乙二醇”)進(jìn)行化學(xué)誘導(dǎo)融合，細(xì)胞融合依賴于細(xì)胞膜的流動(dòng)性。

(3)將融合細(xì)胞在選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，可篩選出雜交瘤細(xì)胞。將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，應(yīng)用抗原抗體雜交技術(shù)進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)。經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。

(4)治療乳腺癌時(shí)，使用抗H蛋白單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，定向殺死癌細(xì)胞，這充分體現(xiàn)了單克隆抗體特異性強(qiáng)(或“識(shí)別抗原部位專一”)的特點(diǎn)。