Question

【題目】研究人員從血管內皮瘤中發(fā)現(xiàn)了一種新的血管增生抑制劑——內皮抑素，它能有效地抑制 血管增生，他們利用基因工程技術，將內皮抑素基因轉移到了酵母菌中使之表達并分泌，圖 示 EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶在質粒和含內皮抑素基因的外源 DNA 片段上的切 割位點，回答下列問題：

（1）根據(jù)上述信息，該基因工程技術的目的基因_____，為與質粒 DNA重組，目的基因和質粒 DNA 均應用限制酶_____切割。

（2）下列關于質粒運載體的說法錯誤的是（________）

A．使用質粒運載體是為了避免目的基因被分解

B．質粒運載體只能在與目的基因重組后進入細胞

C．質粒運載體可能是從細菌或者病毒的 DNA 改造的

D．質粒運載體的復制和表達也遵循中心法則

E．質粒運載體只有把目的基因整合到受體細胞的 DNA 中才能表達 F．沒有限制酶就無法使用質粒運載體

（3）若內皮抑素是一種酶，制備的合理工藝步驟應為_____(選擇正確的序號并排序)。

①過濾 ②沉淀 ③破碎 ④干燥 ⑤提純

（4）固定化酶是從 20 世紀 60 年代迅速發(fā)展起來的一種技術。東北農業(yè)大學科研人員 利用雙重固定法，即采用戊二醛作交聯(lián)劑(使酶相互連接)，海藻酸鈉作為包埋劑來固定小麥 酯酶，研究固定化酶的性質，并對其最佳固定條件進行了探究。圖顯示的是部分研究結 果(注：酶活力為固定化酶催化化學反應的總效率，包括酶活性和酶的數(shù)量)。

從甲圖所示結果可以得出的結論是________, 乙圖曲線表明濃度為_____的海藻酸鈉包埋效果最好，當海藻酸鈉濃度較低時，酶活 力較低原因可能是_________。

Answer 1

【答案】內皮抑素基因 BamHⅠ B C E ①②⑤④ 固定化酯酶比游離酯酶對溫度的變化適應性和酶活力更強 3% 海藻酸鈉濃度較低時包埋不緊密，酶分子容易漏出，數(shù)量不足

【解析】

1-3題考查了基因工程技術，目的基因的獲得方法有三種：從基因文庫中獲取、PCR技術擴增、人工合成法；基因表達載體中的LacZ基因被插入滅活。

4題考查固定化酶技術，圖甲中固定化酶與游離酶相比，對溫度變化的適應性更強且應用范圍較廣。圖乙曲線表明濃度為3%的海藻酸鈉包埋效果最好，此時的酶活力最高；當海藻酸鈉濃度較低時包埋不緊密，酶分子容易漏出，數(shù)量不足，因此酶活力較低。如果制作的凝膠珠顏色過淺，呈白色，則說明海藻酸鈉濃度過低。

（1）由題意知：內皮抑素基因屬于該基因工程的目的基因，為與質粒DNA重組，目的基因和質粒DNA均應用限制酶BamHI切割，暴露相同的黏性末端。

（2）A．使用質粒運載體是為了避免目的基因被分解，A正確；

B、無論與目的基因重組與否，質粒運載體都能進入宿主細胞，B錯誤；

C、質粒通常是來自細菌，病毒沒有質粒，因此質粒運載體可能是從細菌的DNA改造形成的，C錯誤；

D、質粒運載體的復制和表達也遵循中心法則，D正確。

E、質粒運載體在受體細胞的DNA中能獨立表達，E錯誤；

F、質粒作為運載體，必須有限制酶的切割位點，才能與目的基因整合重組，F正確。

故選BCE。

（3）酶制備的合理工藝步驟應為①過濾→②沉淀→⑤提純→④干燥。

（4）通過分析圖甲可知，固定化酶與游離酶相比，對溫度變化的適應性更強且應用范圍較廣，圖乙曲線表明濃度為3%的海藻酸鈉包埋效果最好，此時酶活力最高。當海藻酸鈉濃度較低時包埋不緊密，酶分子容易漏出，數(shù)量不足，因此酶活力較低