Question

如下圖是將人的生長激素基因?qū)�入細菌B細胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖。所用載體為質(zhì)粒A。已知細菌B細胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導入細菌B后，其上的基因能得到表達。請回答下列問題：

（1）人工獲得目的基因的途徑一般有哪兩條？

（2）如何將目的基因和質(zhì)粒相結(jié)合形成重組質(zhì)粒（重組DNA分子）？

（3）目前把重組質(zhì)粒導入細菌細胞時，效率還不高；導入完成后得到的細菌，實際上有的根本沒有導入質(zhì)粒，有的導入的是普通質(zhì)粒A，只有少數(shù)導入的是重組質(zhì)粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細菌是否導入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒：將得到的細菌涂布在一個有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的就是導入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒，反之則沒有。使用這種方法鑒別的原因是________。

（4）若把通過鑒定證明導入了普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的細菌放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，會發(fā)生的現(xiàn)象是________。原因是________。

（5）導入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標志是什么？

Answer 1

答案：
解析：

答案：（1）（2）（5）見方法指導。 　　（3）普通質(zhì)粒A和重組質(zhì)粒都含有抗氨芐青霉素基因 　�。�4）有的能生長，有的不能生長　原因?qū)�入普通質(zhì)粒A的細菌能生長，因為普通質(zhì)粒A上有抗四環(huán)素基因；導入重組質(zhì)粒的細菌不能生長，因為目的基因插在抗四環(huán)素基因中，抗四環(huán)素基因的結(jié)構(gòu)被破壞 　　 　�。�2）將目的基因和質(zhì)粒相結(jié)合形成重組質(zhì)粒的過程是：①用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個有黏性末端的切口；②用同種限制酶切斷目的基因，產(chǎn)生相同的黏性末端；③將切下的目的基因片段插入到質(zhì)粒的切口處，再加入適量的DNA連接酶，使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。 　�。�3）檢測質(zhì)粒或重組質(zhì)粒是否導入受體細胞，均需利用質(zhì)粒上某些標記基因的特性，即對已經(jīng)導入質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒處理的、本身無相應(yīng)特性的受體細胞進行檢測，根據(jù)受體細胞是否具有相應(yīng)的特性來確定。本題利用質(zhì)粒上抗四環(huán)素和抗氨芐青霉素這兩個特性以及它們在質(zhì)粒上的位置進行目的基因是否導入受體細胞的檢測�？拱逼S青霉素這種選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)經(jīng)過導入質(zhì)粒處理的受體細胞，凡能生長的則表明質(zhì)粒導入成功；不能生長的則無質(zhì)粒導入。 　　（4）抗四環(huán)素基因不僅在質(zhì)粒上，而且它的位置正是目的基因插入質(zhì)粒之處，因此有目的基因插入質(zhì)粒形成重組質(zhì)粒時，此處的抗四環(huán)素基因的結(jié)構(gòu)和功能就會被破壞，當然含重組質(zhì)粒的受體細胞就不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長，而質(zhì)粒上無目的基因插入的，四環(huán)素基因結(jié)構(gòu)是完整的，這種受體細胞就能在含四環(huán)互素的培養(yǎng)基上生長。 　　（5）基因成功表達的標志是受體細胞通過轉(zhuǎn)錄、翻譯過程合成出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，即人的生長激素。