Question

14．（1）反芻動物瘤胃內(nèi)棲息著許多以尿素為唯一氮源的微生物，這些微生物能分解尿素是因為它們能合成脲酶．從瘤胃中分離這些微生物必須先制備以尿素為唯一碳源的培養(yǎng)基，采用高壓蒸汽滅菌，采用稀釋涂布平板法接種，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后觀察其中一個平板的菌落分布如圖所示，推測該同學(xué)接種時可能的操作失誤是涂布不均勻，如果發(fā)現(xiàn)每個平板中菌落形態(tài)多樣，其原因可能是尿素分解菌的種類較多，或者操作過程污染了雜菌．
（2）由霉菌發(fā)酵生產(chǎn)果膠酶是食品工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一，果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶等；在探究果膠酶的用量實驗中，因變量是果汁的體積（或果汁的澄清度）．
（3）無菌技術(shù)是影響植物組織培養(yǎng)能否成功的重要因素．用體積分數(shù)為70%的酒精和質(zhì)量分數(shù)為0．l%的氯化汞對外植體消毒，用無菌水清洗，接種時每次使用器械后都需要灼燒滅菌；接種3-4d后，觀察外植體的生長情況，若發(fā)現(xiàn)外植體被污染，分析其原因可能是外植體消毒不徹底，培養(yǎng)基滅菌不徹底．（至少答出兩點）

Answer 1

分析 分析圖解可知，圖示培養(yǎng)基中的菌落利用的稀釋涂布平板法進行接種的．
1．無菌技術(shù)的主要內(nèi)容
①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌
③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行；
④實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸．
2．實驗室常用的消毒方法
煮沸消毒；化學(xué)藥物消毒；紫外線消毒．
3．實驗室常用的滅菌方法
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具；
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品；
③高壓蒸汽滅菌．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）根據(jù)酶的專一性可以判斷，反芻動物瘤胃內(nèi)棲息著許多以尿素為唯一氮源的微生物，這些微生物能分解尿素是因為它們能合成脲酶．從瘤胃中分離這些微生物必須先制備以尿素為唯一碳源的培養(yǎng)基，采用高壓蒸汽滅菌，采用稀釋涂布平板法接種，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后觀察其中一個平板的菌落分布如圖所示，推測該同學(xué)接種時可能的操作失誤是涂布不均勻，如果發(fā)現(xiàn)每個平板中菌落形態(tài)多樣，其原因可能是尿素分解菌的種類較多，或者操作過程污染了雜菌．
（2）果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶等；在探究果膠酶的用量實驗中，因變量是果汁的體積（或果汁的澄清度）．
（3）植物組織培養(yǎng)中，用體積分數(shù)為70%的酒精和質(zhì)量分數(shù)為0．l%的氯化汞對外植體消毒，用無菌水清洗，接種時每次使用器械后都需要灼燒滅菌；接種3-4d后，觀察外植體的生長情況，若發(fā)現(xiàn)外植體被污染，分析其原因可能是外植體消毒不徹底，培養(yǎng)基滅菌不徹底．
故答案為：
（1）脲酶   尿素   高壓蒸汽滅菌   稀釋涂布平板  涂布不均勻
尿素分解菌的種類較多，或者操作過程污染了雜菌（答對其中一點就給分）
（2）多聚半乳糖醛酸酶   果汁的體積（或果汁的澄清度）
（3）體積分數(shù)為70%的酒精   無菌水   灼燒    外植體消毒不徹底，培養(yǎng)基滅菌不徹底（接種時操作不規(guī)范等）

點評 微生物這部分內(nèi)容是選修一的熱點，在考查選修一的知識點的時候，為了增加考查的知識點的面，命題人往往將微生物、酶、植物有效成分的提取相關(guān)的知識點組合在一起進行考查，在復(fù)習一定要注意之間的聯(lián)系．