Question

科學(xué)家將人的胰島素基因與質(zhì)粒重組后，導(dǎo)入牛的受精卵，并成功從牛奶中提取到了人胰島素．回答下列相關(guān)問題：
（1）獲取目的基因的主要途徑包括

 

和

 

．
（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中，目的基因和質(zhì)粒用同一種

 

進(jìn)行切割．
（3）在將基因表達(dá)載體導(dǎo)入牛的受精卵的過程中，常采用

 

法，若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中，則通常采用

 

溶液處理大腸桿菌，使其成為

 

細(xì)胞．
（4）為了得到較多的卵細(xì)胞，可以對受體母牛注射適宜劑量的

 

；利用獲能的精子進(jìn)行體外受精，經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)至

 

期，最后進(jìn)行

 

移植，最終獲得“符合要求的個(gè)體”，具體是指

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．
目的基因?qū)�入不同的受體細(xì)胞中方法不同：導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞，如受精卵，用顯微注射法；導(dǎo)入植物細(xì)胞，一般利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；導(dǎo)入微生物細(xì)胞，一般用Ca²⁺處理細(xì)胞．

解答： 解：（1）獲取目的基因的主要途徑包括：直接提取和人工合成．
（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中，目的基因和質(zhì)粒用同一種限制酶進(jìn)行切割，以便形成相同的黏性末端．
（3）在將基因表達(dá)載體導(dǎo)入牛的受精卵的過程中，常采用顯微注射法，若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中，則通常采用CaCl₂溶液處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞．
（4）胚胎移植時(shí)，常對受體母牛注射適宜劑量的促性腺激素，使其同期發(fā)情，為胚胎移植進(jìn)入受體提供相同的生理環(huán)境；體外受精后，受精卵需培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚期，再進(jìn)行胚胎移植，最終獲得能分泌含人胰島素牛奶的母牛．
故答案為：
（1）直接提取   人工合成　
（2）限制酶　
（3）顯微注射　CaCl₂　感受態(tài)　
（4）促性腺激素　桑椹胚或囊胚　胚胎　能分泌含人胰島素牛奶的母牛

點(diǎn)評：本題考查了基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，考生要能夠識記目的基因獲取的一般方法；明確質(zhì)粒和目的基因需要用同一種限制酶切割；掌握不同受體細(xì)胞導(dǎo)入目的基因的不同方法；識記胚胎工程中胚胎移植的步驟和時(shí)期等．