Question

【題目】酸奶、泡菜的制作都離不開(kāi)乳酸菌，其代謝產(chǎn)物乳酸菌素（小分子蛋白質(zhì)）和柚皮中的柚皮精油均有抑菌作用，兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。

（1）某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料純化乳酸菌，分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用________對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，分離純化時(shí)應(yīng)挑選出_____________的菌落作為候選菌。若用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)單位體積泡菜液中乳酸菌的數(shù)量，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目______，原因是_________________________________________________。

（2）通常不用水中蒸餾法提取柚皮精油，是因?yàn)?/span>_________________________________________，該過(guò)程得到的糊狀液體可通過(guò)__________初步除去其中的固體物和殘?jiān)��?/span>

（3）抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，在長(zhǎng)滿致病菌的平板上，會(huì)出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈�？赏ㄟ^(guò)測(cè)定透明圈的____________來(lái)比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

Answer 1

【答案】無(wú)菌水 有透明圈 少 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 原料容易焦糊和有效成分會(huì)發(fā)生部分水解 過(guò)濾 大�。�面積、直徑、數(shù)量）

【解析】

結(jié)合題干信息，為了分離純化乳酸菌，得到單菌落，防止雜菌感染，應(yīng)用無(wú)菌水稀釋，通過(guò)涂布平板法達(dá)到目的。在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用是中和乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸和利于乳酸菌的識(shí)別和分離；分離純化時(shí)應(yīng)挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌。水中蒸餾柚皮易發(fā)生焦糊現(xiàn)象，有效成分檸檬烯容易水解，常用壓榨法提取柚皮精油。

（1）由于泡菜濾液中，乳酸菌的濃度過(guò)高，因此若直接培養(yǎng)難以得到單一菌落，進(jìn)而影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)效果。為了避免其他菌類影響實(shí)驗(yàn)效果，因此在進(jìn)行泡菜濾液梯度稀釋時(shí)應(yīng)使用無(wú)菌水。乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸，乳酸會(huì)溶解選擇培養(yǎng)基中碳酸鈣而出現(xiàn)透明圈，所以分離純化時(shí)應(yīng)挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌。用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)乳酸菌的數(shù)目，測(cè)得的數(shù)目是菌落數(shù)，而一個(gè)菌落可能是由一個(gè)活細(xì)胞或幾個(gè)聚集在一起的活細(xì)胞增殖而成的群體。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)單位體積泡菜液中乳酸菌的數(shù)量，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。

（2）水中蒸餾法容易導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解，如果利用水中蒸餾法柚皮易發(fā)生焦糊現(xiàn)象，而且有效成分檸檬烯容易水解，因此一般采用壓榨法提取柚皮精油�？赏ㄟ^(guò)過(guò)濾法初步除去壓榨液中的固體物和殘?jiān)��?/span>

（3）抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，在長(zhǎng)滿致病菌的平板上，可通過(guò)測(cè)定以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈的大小來(lái)比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果，透明圈越大，抑菌效果越好。