Question

【題目】佩戴口罩是預(yù)防病原體感染的有效措施。某研究小組對(duì)非滅菌的一次性口罩中的微生物進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)分析微生物的種類(lèi)和數(shù)量來(lái)確定口罩的合格性�；卮鹣铝袉�(wèn)題。

（1）從包裝中取樣，準(zhǔn)確稱(chēng)取10 g（近似10 mL）樣品。剪碎后加入到90 mL滅菌生理鹽水中，充分混勻，得到一個(gè)生理鹽水樣液。待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作菌落計(jì)數(shù)。取4個(gè)培養(yǎng)基，進(jìn)行___________滅菌處理，待冷卻后采用___________法分別接種0．1 mL樣液，放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)分別為31、42、36和35，那么1 g口罩樣品中細(xì)菌數(shù)量為___________。根據(jù)《中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)非滅菌一次性口罩的微生物指標(biāo)要求（如表），該研究小組檢測(cè)的口罩___________（填“是”或“否”）合格。

口罩微生物指標(biāo)

細(xì)菌菌落數(shù) CFU/g	大腸桿菌	綠膿桿菌	金黃色葡萄球菌	膿血性鏈球菌	真菌
≤100	不得檢出	不得檢出	不得檢出	不得檢出	不得檢出

?

?

（2）為確定檢測(cè)樣液中大腸桿菌數(shù)目，需在培養(yǎng)基中加入___________用于鑒別，統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基上___________（顏色）菌落的數(shù)目。

（3）若要對(duì)口罩中的金黃色葡萄球菌進(jìn)行檢測(cè)，將樣液接種到甘露醇高鹽瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)，此培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。培養(yǎng)一段時(shí)間后，該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜止培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是________________________________________。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽??? 稀釋涂布平板??? 3600??? 否??? 伊紅美藍(lán)??? 黑色??? 選擇??? 振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率???

【解析】

1、消毒和滅菌：

?	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對(duì)象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

2、微生物常見(jiàn)的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌應(yīng)該采用高壓蒸汽滅菌法；計(jì)數(shù)活菌數(shù)目時(shí)，采用的接種方法是稀釋涂布平板法；為了結(jié)果準(zhǔn)確，計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選取菌落數(shù)在30～300內(nèi)的平板，那么1g口罩樣品中細(xì)菌數(shù)量為（31+42+36+35）÷4÷0.1×10=3600。根據(jù)表格中信息：合格口罩不得檢測(cè)出細(xì)菌和真菌，可知該研究小組檢測(cè)的口罩不合格。

（2）為確定檢測(cè)樣液中大腸桿菌數(shù)目，需在培養(yǎng)基中加入伊紅-美藍(lán)用于鑒別，統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基上（紫）黑色菌落的數(shù)目。

（3）若要對(duì)口罩中的金黃色葡萄球菌進(jìn)行檢測(cè)，將樣液接種到甘露醇高鹽瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基上只有金黃色葡萄球菌可以生存，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。培養(yǎng)一段時(shí)間后，該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜止培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快，原因是振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。