Question

【題目】復(fù)合型免疫缺陷癥 （SCID）患者缺失ada基因,利用利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)將人正常ada基因轉(zhuǎn)入患者自身T細(xì)胞,可改善患者的免疫功能.如圖顯示該過程的主要步驟,回答下列問題:

(1)圖中所示獲取正常ada基因的方法是從基因文庫中獲取目的基因,基因文庫包括基因組文庫和________________.若要大量獲取該目的基因,可通過PCR技術(shù)迸行擴(kuò)增.PCR技術(shù)是利用_______________的原理,需要__________________酶催化。

(2)PCR技術(shù)擴(kuò)增的前提是根據(jù)一段已知目的基因的核苷酸序列合成_____________________，另外在PCR過程中需要控制反應(yīng)溫度方面，先用_______ ℃左右高溫使DNA受熱變性，而這一過程在細(xì)胞內(nèi)是通過________________ 的催化作用實(shí)現(xiàn)的.

(3)將人正常ada基因轉(zhuǎn)入患者自身T細(xì)胞進(jìn)行治病的方法叫做 ______________________ .

Answer 1

【答案】 部分基因文庫 DNA復(fù)制 熱穩(wěn)定DNA聚合酶 引物 90-95℃ 解旋酶 （體外）基因治療

【解析】試題分析：步驟①是從基因文庫的受體菌群中獲取目的基因——正常ada基因；步驟②是構(gòu)建基因表達(dá)載體。在該步驟中，病毒作為運(yùn)載體起作用；步驟③是將構(gòu)建的基因表達(dá)載體制成病毒誘導(dǎo)劑；步驟④是通過病毒誘導(dǎo)劑將目的基因整合到受體細(xì)胞——患者的T細(xì)胞內(nèi)，進(jìn)行體外培養(yǎng)增殖，之后再移植如患者體內(nèi)。

（1）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫如cDNA文庫；PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制，需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）催化。

（2）與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比，PCR技術(shù)的不同點(diǎn)：首先要根據(jù)一段已知目的基因的核苷酸序列合成引物，再在熱穩(wěn)定DNA聚合酶作為催化劑將引物與目的基因DNA單鏈結(jié)合；另外在溫度控制方面，在PCR中先用90～95℃左右高溫處理使DNA變性（解旋），而這一過程在細(xì)胞內(nèi)是通過解旋酶的催化作用實(shí)現(xiàn)的。

（3）將人正常ada基因轉(zhuǎn)入患者自身T細(xì)胞進(jìn)行治病的方法叫做（體外）基因治療。