Question

【題目】下圖為蘋果醋的工業(yè)生產流程，以及實驗室分離、純化發(fā)酵菌的方法步驟。請回答以下問題：

純化發(fā)酵菌的方法步驟:配制培養(yǎng)基→培養(yǎng)基滅菌→接種→培養(yǎng)→挑選符合要求的菌落。

（1）在微生物的實驗室培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是___________，因此需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌，空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使破壞DNA的結構，也能使蛋白質___________。

（2）上圖中①過程與②過程需要接種的發(fā)酵菌分別是_____________________。

（3）某同學計劃統(tǒng)計食醋中該發(fā)酵菌的總數，他選用10-4、10-5、10-6稀釋液進行涂布，每種稀釋液都設罝了3個培養(yǎng)皿。從對照實驗的角度看，還應設置的一組對照組是___________________，設置對照組的目的是______________________。

（4）對同一濃度的發(fā)酵菌稀釋液，分別用血球計數板計數和稀釋涂布平板法計數，若不存在實驗誤操作， 則前者的數量___________（填“多于”、“等于”或“小于”）后者，其原因是____________________。

Answer 1

【答案】 防止外來雜菌的入侵 變性（空間結構破壞） 酵母菌和醋酸菌 不接種的空白培養(yǎng)基 證明培養(yǎng)基制備過程中是否被雜菌污染 多于 有些菌落連接在一起，計數偏小

【解析】試題分析：本題考查果酒和果醋的制作、微生物的分離和純化，意在考查學生的識圖能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯(lián)系，形成知識網絡結構的能力；能運用所學知識，準確判斷問題的能力，屬于考綱識記和理解層次的考查。在利用酵母菌發(fā)酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時間使其繁殖，再隔絕氧氣進行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性；醋酸菌是好氧性細菌，當缺少糖源時和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃。統(tǒng)計菌落數目的方法有稀釋涂布平板法和利用顯微鏡直接計數法。其中稀釋涂布平板法是活菌計數法，注意要選擇菌落數為30-300的平板進行計數，在接種時還要設置空白對照。當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數來推測樣品中大約含有的活菌數。

（1）微生物培養(yǎng)時，獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是防止外來雜菌的入侵；對于培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要進行滅菌處理，人的雙手需要消毒處理；空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能讓蛋白質變性，同時還能破壞DNA的結構。

（2）圖中①過程是制作果酒的過程，使用的微生物菌種是酵母菌；②過程是制作果醋的該過程，使用的微生物菌種是醋酸菌。

（3）實驗設計過程應遵循對照原則，該實驗還應增設一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對照，以證明培養(yǎng)基制備過程中是否被雜菌污染。

（4）血球計數板計數法，統(tǒng)計的是直接看到的細菌，無論死活都會被記錄上。相比之下平板計數法只能統(tǒng)計活的且能在所使用的平板上生長繁殖的細菌。此外平板計數法統(tǒng)計的是菌落數而不是細菌的個數，有些菌落連接在一起，那么只能形成一個菌落，計數偏小。