Question

【題目】如圖為培育轉(zhuǎn)基因奶牛獲得人血清白蛋白（HSA）的流程．回答下列問題：
（1）PCR擴增HSA基因使用的酶是 ， 構(gòu)建含有人HSA基因表達載體時所用的工具酶有 ．
（2）圖中培育轉(zhuǎn)基因動物屬于（填“有性”“無性”）繁殖，過程①常用的方法是 ． 在過程②進行之前，需對早期胚胎進行性別鑒定，可取胚胎細胞進行DNA分析，其采用的基因探針來自（填“�！薄靶浴保┤旧�體．
（3）檢測牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用技術(shù)，但在轉(zhuǎn)基因牛乳汁中卻沒有檢測到HSA的存在，若從構(gòu)建基因表達載體的角度分析，最可能的原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶、耐高溫DNA聚合酶）；限制酶和DNA連接酶
（2）有性；顯微注射法；性
（3）抗原﹣抗體雜交；位于目的基因前后的啟動子和終止子設(shè)計不理想，導(dǎo)致目的基因不能進行表達
【解析】解：（1）PCR技術(shù)是在較高溫度下進行的，因此需要使用熱穩(wěn)定DNA聚合酶；構(gòu)建基因表達載體時，首先需要用限制面前切割含有目的基因的外源DNA和運載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA．（2）圖中培育轉(zhuǎn)基因動物時經(jīng)過體外受精，因此屬于有性繁殖；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；在過程②進行之前，需對早期胚胎進行性別鑒定，可取胚胎細胞進行DNA分析，其采用的基因探針來自性染色體．（3）檢測目的基因是否表達產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)可采用抗原﹣抗體雜交技術(shù)．目的基因的正常表達離不開啟動子和終止子，若在轉(zhuǎn)基因牛乳汁中卻沒有檢測到HSA的存在，從構(gòu)建基因表達載體的角度分析，最可能的原因是位于目的基因前后的啟動子和終止子設(shè)計不理想，導(dǎo)致目的基因不能進行表達． 所以答案是：（1）熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶、耐高溫DNA聚合酶） 限制酶和DNA連接酶（2）有性 顯微注射法 性（3）抗原﹣抗體雜交 位于目的基因前后的啟動子和終止子設(shè)計不理想，導(dǎo)致目的基因不能進行表達
【考點精析】根據(jù)題目的已知條件，利用基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識可以得到問題的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)．