Question

【題目】蘇云金桿菌(Bt)能產(chǎn)生具有殺蟲作用的毒素蛋白。如圖l是4種限制酶及其所識別的序列與酶切位點(diǎn)，圖2是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因棉花的培育過程示意圖，圖2中a和b分別表示抗卡那霉素基因和抗四環(huán)素基因(棉花細(xì)胞中不含抗卡那霉素基因和抗四環(huán)素基因)，據(jù)圖回答下列問題：

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的原理是___________________，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成___________________，用此方法得到的所需目的基因至少要復(fù)制_____________次。

（2）基因工程的核心步驟是_________________，假設(shè)圖2中質(zhì)粒原來的BamH I識別位點(diǎn)的堿基序列變?yōu)榱肆硪环N限制酶Bcl I識別位點(diǎn)的堿基序列，現(xiàn)用Bcl I和Hind Ⅲ切割質(zhì)粒，則目的基因右側(cè)還能選擇BamH I進(jìn)行切割，并獲得所需重組質(zhì)粒嗎?_________，請說明理由_____________________________________。

（3）抗蟲基因能在棉花細(xì)胞中表達(dá)，是因?yàn)椴煌�生物共�?/span>____________ 。導(dǎo)入重組質(zhì)粒的棉花細(xì)胞能在含____________________(填抗生素種類)的培養(yǎng)基上生長。

Answer 1

【答案】 DNA雙鏈復(fù)制 引物 3 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 可以 切出的粘性末端相同 一套密碼子 四環(huán)素

【解析】【試題分析】

本題考查基因工程的相關(guān)知識。解題時(shí)首先要正確識圖，并從題目所給的圖形中獲取有效信息，例如要能看出“限制酶Bcl I和限制酶BamH I切出的黏性末端相同”的信息，然后根據(jù)各小題的提示內(nèi)容，梳理相關(guān)知識點(diǎn)，對各小題進(jìn)行分析作答。

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的原理是DNA雙鏈復(fù)制；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物；根據(jù)DNA分子具有半保留復(fù)制的特點(diǎn)，可推知用此方法得到的所需目的基因至少要復(fù)制3次。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟；據(jù)圖1可知，限制酶Bcl I和限制酶BamH I切出的黏性末端相同，所以目的基因右側(cè)仍然還能選擇BamH I進(jìn)行切割，并獲得所需重組質(zhì)粒。

（3）抗蟲基因能在棉花細(xì)胞中表達(dá)，是因?yàn)椴煌�生物共用一套密碼子；據(jù)圖2可知，Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA均需用限制酶BamH I和Hind Ⅲ切割，這樣會導(dǎo)致重組質(zhì)粒上缺失a部分(抗卡那霉素基因)，而只含b部分（抗四環(huán)素基因），因此，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的棉花細(xì)胞能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長。