Question

【題目】應(yīng)用生物工程技術(shù)可以獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請回答下列有關(guān)生物工程的問題。

（1）基因工程中構(gòu)建基因表達(dá)載體需要用到________酶和DNA連接酶，DNA連接酶中，__________可連接DNA的兩個(gè)末端。

（2）大腸桿菌PUC19質(zhì)粒如圖所示。

Lacz基因是PUC19質(zhì)粒上重要的標(biāo)記基因，其表達(dá)產(chǎn)物能水解X-gal，進(jìn)而使大腸桿菌菌落呈藍(lán)色。用EcoRl構(gòu)建重組質(zhì)粒，導(dǎo)入受體菌（不含LacZ基因和氨卡青霉素抗體基因）并進(jìn)行檢測。下列敘述不正確的是_____（單選）

A.應(yīng)用涂布法將受體菌群接種在培養(yǎng)基表面

B.培養(yǎng)基中應(yīng)含有氨卡青霉素和X-gal

C.挑取菌落的接種環(huán)在操作前后都應(yīng)該灼燒滅菌

D.應(yīng)挑取培養(yǎng)基表面的藍(lán)色菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)

（3）植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，最常用的導(dǎo)入目的基因的方法是_____，其中需要的運(yùn)載體是________，目的基因插入到該運(yùn)載體的______中，以便使植物細(xì)胞得以轉(zhuǎn)化。這是______植物和裸子植物常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法。

（4）動(dòng)物基因工程中，一般把目的基因?qū)�入�?dòng)物的______細(xì)胞中。

Answer 1

【答案】 限制性核酸內(nèi)切酶 (限制酶） T4DNA連接酶 D 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 Ti質(zhì)粒 T-DNA 雙子葉 受精卵

【解析】試題分析：基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲�、诨�因表達(dá)載體的構(gòu)建③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞④目的基因的檢測與鑒定。DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體。基因表達(dá)載體主要由目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子和終止子，其中標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。

（1）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)要用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶，T4DNA連接酶可連接DNA的兩個(gè)末端。

（2）由題意可知，受體菌必須均勻分布在培養(yǎng)基中，應(yīng)用涂布法將受體菌群接種在培養(yǎng)基表面，A正確；氨芐青霉素抗性基因?qū)儆跇?biāo)記基因，EcoRI的酶切位點(diǎn)位于LacZ基因上，因此培養(yǎng)基中應(yīng)含有氨芐青霉素和X-gal，含有目的基因的大腸桿菌能在該培養(yǎng)基上生存，但不會出現(xiàn)藍(lán)色，B正確；為了防止雜菌污染，以及目的菌污染環(huán)境，因此挑取菌落的接種環(huán)在操作前后都應(yīng)該灼燒滅菌，C正確；由于含有目的基因的大腸桿菌上存在氨芐青霉素抗性基因，而LacZ基因被破壞，所以應(yīng)挑取培養(yǎng)基表面的氨芐青霉素抗性基因的菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。

（3）植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，其中需要的運(yùn)載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，目的基因插入到該運(yùn)載體的T-DNA中，以便使植物細(xì)胞得以轉(zhuǎn)化，這是雙子葉植物和裸子植物常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法。

（4）動(dòng)物基因工程中，一般把目的基因?qū)�入�?dòng)物的受精卵細(xì)胞中。