Question

6．油菜的株高由等位基因G和g決定，GG為高桿，Gg為中桿，gg為矮桿．B基因是另一種植物的高桿基因，B基因與G基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高與這兩個基因的數(shù)量正相關(guān)．如圖1所示是培育轉(zhuǎn)基因油菜的操作流程．請回答下列問題：
（1）構(gòu)建表達(dá)載體需用的工具酶有限制酶和DNA連接酶．
（2）經(jīng)轉(zhuǎn)化獲得的農(nóng)桿菌能夠侵染油菜細(xì)胞并將插入了B基因的整合到受體細(xì)胞的上．可用含草丁膦、的培養(yǎng)基來篩選含有目的基因的油菜受體細(xì)胞．培育轉(zhuǎn)基因油菜主要運用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
（3）若將一個B基因連接到了中桿油菜的染色體上并在植株中得到成功表達(dá)，培育了甲～丁四種轉(zhuǎn)基因油菜（如圖2所示）．

①與甲的株高相同的是乙�。�四種轉(zhuǎn)基因油菜分別自交，在不考慮交叉互換的前提下，子代有3種表現(xiàn)型的是丙．
②另有一種轉(zhuǎn)基因油菜的自交子代也有3種表現(xiàn)型，請在圖3中染色體上標(biāo)出B基因的位置．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示為培育轉(zhuǎn)基因油菜的操作流程，其中①為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要DNA連接酶；采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；將受體細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因油菜需要采用植物組織培養(yǎng)法，該技術(shù)包括脫分化和再分化過程．

解答 解：（1）①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶切割目的基因和運載體，DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組質(zhì)粒．
（2）獲得的農(nóng)桿菌能夠侵染油菜細(xì)胞并將插入了B基因的T-DNA質(zhì)粒整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上．由圖可知，質(zhì)粒上含有草丁膦抗性基因，因此可用含草丁膦的培養(yǎng)基來篩選含有目的基因的油菜受體細(xì)胞．由以上分析可知，轉(zhuǎn)基因油菜的培育主要運用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
（3）①B基因與G基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高與這兩個基因的數(shù)量正相關(guān)．甲植株含有兩個有效顯性基因；乙植株含有2個有效顯性基因；丙中B基因的插入導(dǎo)致G基因被破壞，因此丙植株只有一個有效顯性基因；丁植株含有2個顯性基因．所以與甲的株高相同的是乙和�。�四種轉(zhuǎn)基因油菜分別自交，其中甲后代有5種表現(xiàn)型（含有4個顯性基因、含有3個顯性基因、含有2個顯性基因、含有1個顯性基因、不含顯性基因）、乙后代只有1種表現(xiàn)型（均含有2個顯性基因，即GGbb、ggBB、GgBb）、丙后代只有3種表現(xiàn)型（含有一個有效顯性基因B、不含顯性基因、含有2個有效顯性基因BB）、丁后代只有1種表現(xiàn)型（均含有2個顯性基因）．
②另有一種轉(zhuǎn)基因油菜自交子代也有3種表現(xiàn)型，則B基因應(yīng)該在G基因所在的染色體上，表現(xiàn)為連鎖遺傳，其在染色體上的位置如圖：

故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶
（2）T-DNA  染色體DNA、草丁膦  植物組織培養(yǎng)
（3）①乙丁  丙
②

點評 本題考查基因工程的原理及技術(shù)、基因自由組合定律的實質(zhì)及應(yīng)用，要求考生識記基因工程的概念、原理、過程及操作步驟；掌握基因自由組合定律的實質(zhì)，能根據(jù)題中信息“B基因是另一種植物的高桿基因，B基因與G基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高與這兩個基因的數(shù)量正相關(guān)”，再結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷子代的情況．