Question

【題目】I以富含纖維素的作物秸稈為原料、利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)乙醇，是現(xiàn)代化石能源的重要途徑�？茖W家通過實驗篩選出分解纖維素能力較強的菌株，實驗流程如下。

請回答:

（1）樣品最好取自于______的土壤。

（2）篩選過程中，可以采用______染色法進行鑒定，其中______的菌落中的菌種分解纖維素能力較強。

（3）培養(yǎng)基b應為______（固體、液體）培養(yǎng)基。擴大培養(yǎng)后，可采用______的方法進行計數(shù)。

（4）得到的目的菌種，一般用______法進行固定，常用的多孔性載體有______（寫出1種即可）。在工業(yè)生產(chǎn)中使用固定化菌種的優(yōu)點是____________（寫出2點即可）。

Ⅱ腫瘤細胞的蛋白PD-L1能夠與T細胞的蛋白PD-1結(jié)合，抑制免疫系統(tǒng)對腫瘤的殺傷作用。某種靶向藥物可以阻斷上述結(jié)合過程，從而增強免疫系統(tǒng)對腫瘤的殺傷作用。下圖是制備該藥物的流程圖：

請據(jù)圖回答：

（1）以______作為抗原注入小鼠體內(nèi)，發(fā)生免疫反應后，從小鼠體內(nèi)的______（器官）中提取細胞a。

（2）細胞a與b能融合的原理是______，常用的誘導方法有______（寫出2個即可）。經(jīng)過誘導，兩兩融合的細胞有______類。

（3）細胞d的特點是：____________�？蓪⒓毎�d通過______或______進行大規(guī)模培養(yǎng)。

（4）鑒定提取物中是否含有該靶向藥物時，可取適量提取物，加入______，觀察是否出現(xiàn)凝集沉淀。

Answer 1

【答案】富含纖維素 剛果紅 透明圈直徑越大 液體 顯微鏡直接計數(shù) 包埋 海藻酸鈉 可以重復使用，減少投資（穩(wěn)定性強、操作簡便、發(fā)酵速度快、生產(chǎn)周期短、酒精得率高） PD-L1（或蛋白PD-L1） 脾 細胞膜具有流動性 聚乙二醇、滅活的病毒、電激等 3 既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體 體外培養(yǎng) 注入小鼠腹腔 PD-L1（或蛋白PD-L1）

【解析】

I本題考查纖維素分解菌的分離和培養(yǎng),要求考生識記分離分解纖維素的微生物的原理,掌握固定化術(shù)及優(yōu)點,能結(jié)合所學的知識準確題；Ⅱ本題主要考查人體免疫系統(tǒng)在維持穩(wěn)態(tài)中的作用以及單克隆抗體制備過程,意在考查學生對基礎(chǔ)知識的理解掌握,難度適中。據(jù)圖分析,細胞a是經(jīng)過抗原免疫的B淋巴細胞,細胞b是骨髓瘤細胞,篩選1是通過篩選得到雜交瘤細胞c(去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞),篩選2是選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞d,然后進行體外和體內(nèi)培養(yǎng),分離提取即可。

I (1)要篩選出分解纖維素能力較強的菌株,樣品最好取自于富含纖維素的土壤。

(2)在培養(yǎng)基中加入剛果紅,可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物,當纖維素被分解后紅色復合物不能形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,從而可篩選纖維素分解菌,其中透明圈直徑越大的菌落中的菌種分解纖維素能力較強。

(3)要擴大培養(yǎng)菌種,應該采用液體培養(yǎng)基。擴大培養(yǎng)后,可采用顯微鏡直接計數(shù)的方法進行計數(shù)。

(4)固定化細胞一般采用包埋法,常用的多孔性載體有海藻酸鈉。在工業(yè)生產(chǎn)中使用固定化菌種的優(yōu)點是:可以重復使用,減少投資、穩(wěn)定性強、操作簡便、發(fā)酵速度快、生產(chǎn)周期短、酒精得率高等。

Ⅱ(1)由圖示可知,以PD-L1作為抗原注入小鼠體內(nèi),發(fā)生免疫反應后,從小鼠體內(nèi)的脾臟中提取細胞a。

(2)細胞a與b能融合的原理是細胞膜具有流動性,常用的誘導方法有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等。經(jīng)過誘導,兩兩融合的細胞有3類,即瘤瘤細胞、BB細胞、雜交瘤細胞。

(3)細胞d的特點是:既能無限增殖,又能產(chǎn)生專一抗體。可將細胞d通過體外培養(yǎng)或注入小鼠腹腔進行大規(guī)模培養(yǎng)。

(4)鑒定提取物中是否含有該靶向藥物時,可取適量提取物,加入PD-1,觀察是否出現(xiàn)凝集沉淀,若出現(xiàn)凝集沉淀,則說明提取物中含有該靶向藥物。