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下面是在農桿菌Ti質�；A上構建的植物抗蟲基因表達載體的示意圖。請據圖回答：

（1）為了擴大基因表達載體的數量，需將基因表達載體再植入農桿菌中并對農桿菌進行培養(yǎng)，此時，在培養(yǎng)農桿菌的培養(yǎng)基中應加入________，該培養(yǎng)基按用途劃分屬于________。

（2）帶有抗蟲基因的農桿菌進入棉花細胞后，要檢測抗蟲基因是否插入到棉花的染色體DNA上，常用的方法是________；要檢測抗蟲基因在棉花體內是否翻譯成蛋白質，必需先從轉基因棉花中提取蛋白質，再用相應的________方法來確定是否已形成毒蛋白；如果在個體水平上鑒定抗蟲基因是否轉化成功，可以通過________實驗來實現(xiàn)。

（3）Ti質粒的分子大小有200 kb（千堿基對）左右，然而能進入植物細胞的只有一小部分約25 kb（稱為T－DNA）。在這一小部分的兩端各有一個25 bp（堿基對）長的重復序列LB和RB，這兩個序列對這一小部分DNA進入植物細胞是不可缺少的。實驗證明只要Ti質粒上保留了這兩個序列，即使這兩個序列之間的其它序列被不同程度地改變（如插入一個外源DNA片段），這一小部分也仍然可以轉移并整合到植物的基因組中。

①在構建的T－DNA過程中，還應該具有________和________等結構，才能保證進入植物體的抗蟲基因能夠順利表達。

②Ti質粒不同于其它質粒的最大特點就是它含有T－DNA，如果給你一個不含T－DNA的質粒，你如何把它構建成含有T－DNA的質粒？________。

練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源：福建省三明一中2012屆高三第二次學段考生物試題 題型：071

下面是一項“利用轉基因番茄生產人胰島素的方法”的專利摘要，請回答：

發(fā)明利用轉基因番茄作為生物反應器生產人胰島素。所用的人胰島素基因是依據植物偏愛密碼子的原則來設計所含的密碼子，通過人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的內質網滯留序列，避免胰島素在植物細胞中的降解。將該基因置于CaMV 35S啟動子和果實專一性啟動子2A12的驅動之下通過農桿菌介導的方法轉入番茄中，在番茄的果實中表達人胰島素。

（1）此基因工程中的目的基因是_________，將人工合成的DNA片段拼接在一起，所需要的酶有_________。

（2）要想在體外獲得大量該目的基因的片段，可以采用_________技術。

（3）試分析在C端加上KDEL的內質網滯留序列，為什么可以避免胰島素在植物細胞中的降解？_________。

（4）用目的基因與農桿菌的Ti質粒結合構建表達載體，該表達載體的組成中不應含有的是_________（從下列選項中選擇）。

①目的基因

②CaMV 35S啟動子

③果實專一性啟動子2A12

④RNA引物

⑤標記基因

⑥T-DNA

⑦RNA聚合酶基因片段

⑧終止子

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科目：高中生物 來源：2014屆天津市六校高三上學期第一次聯(lián)考生物試卷（解析版） 題型：綜合題

（16分）Ⅰ.（8分）土壤農桿菌是一種能引起雙子葉植物產生冠癭瘤的土壤細菌，它帶有一個大的質粒叫Ti質粒，它是攜帶細菌DNA向宿主植物基因組轉化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才轉入植物細胞的基因組。結構及轉化過程如圖所示，回答相關問題：

（1）為了使某種植物具有抗旱性狀而又不引起植物產生冠癭瘤，需對Ti質粒進行修飾，即祛除瘤基因，將抗旱基因轉移至________，然后在一定條件下將外植體在含土壤農桿菌的稀釋培養(yǎng)基上培養(yǎng)，此時修飾的T—DNA轉入植物細胞并整合到植物基因組中。以上過程需要的工具有                                          。

（2）將上述外植體置于一個含有某種抗生素的合適培養(yǎng)基中進行篩選，發(fā)生轉化的外植體開始增殖，形成________      ，通過產生不定芽再長出整個植物。

（3）基因轉化是否成功應對轉基因植物進行鑒定，可以直接在________水平對轉基因植物與非轉基因植物進行比較。

Ⅱ．（8分）請回答基因工程方面的有關問題：

(1)利用PCR技術擴增目的基因，其原理與細胞內DNA復制類似（如圖所示）。

（1）圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎。

①從理論上推測，第四輪循環(huán)產物中不含有引物B的DNA片段所占的比例為      。

②在第    輪循環(huán)產物中首次出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。

（2）PCR反應體系中含有的DNA聚合酶具有           特點，下面的表達式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因為                   。

 

 

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科目：高中生物 來源：2010～2011學年度黑龍江省高二下學期期中考試生物試卷 題型：綜合題

（16分）下面是在農桿菌Ti質�；A上構建的植物抗蟲基因表達載體的示意圖。請據圖回答：

（1）為了擴大基因表達載體的數量，需將基因表達載體再植入農桿菌中并對農桿菌進行培養(yǎng)，此時，在培養(yǎng)農桿菌的培養(yǎng)基中應加入              ，該培養(yǎng)基按用途劃分屬于 。

（2）帶有抗蟲基因的農桿菌進入棉花細胞后，要檢測抗蟲基因是否插入到棉花的染色體DNA上，常用的方法是               ；要檢測抗蟲基因在棉花體內是否翻譯成蛋白質，必需先從轉基因棉花中提取蛋白質，再用相應的   方法來確定是否已形成毒蛋白；如果在個體水平上鑒定抗蟲基因是否轉化成功，可以通過   實驗來實現(xiàn)。

（3）Ti質粒的分子大小有200kb（千堿基對）左右，然而能進入植物細胞的只有一小部分約25kb（稱為T—DNA）。在這一小部分的兩端各有一個25bp（堿基對）長的重復序列LB和RB，這兩個序列對這一小部分DNA進入植物細胞是不可缺少的。實驗證明只要Ti質粒上保留了這兩個序列，即使這兩個序列之間的其它序列被不同程度地改變（如插入一個外源DNA片段），這一小部分也仍然可以轉移并整合到植物的基因組中。

①  在構建的T—DNA過程中，還應該具有和  等結構，才能保證進入植物體的抗蟲基因能夠順利表達。

②Ti質粒不同于其它質粒的最大特點就是它含有T—DNA，如果給你一個不含T—DNA的質粒，你如何把它構建成含有T—DNA的質粒？               。

 

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科目：高中生物 來源：2010～2011學年度黑龍江省哈六中高二下學期期中考試生物試卷 題型：綜合題

（16分）下面是在農桿菌Ti質�；A上構建的植物抗蟲基因表達載體的示意圖。請據圖回答：

（1）為了擴大基因表達載體的數量，需將基因表達載體再植入農桿菌中并對農桿菌進行培養(yǎng)，此時，在培養(yǎng)農桿菌的培養(yǎng)基中應加入             ，該培養(yǎng)基按用途劃分屬于。
（2）帶有抗蟲基因的農桿菌進入棉花細胞后，要檢測抗蟲基因是否插入到棉花的染色體DNA上，常用的方法是              ；要檢測抗蟲基因在棉花體內是否翻譯成蛋白質，必需先從轉基因棉花中提取蛋白質，再用相應的  方法來確定是否已形成毒蛋白；如果在個體水平上鑒定抗蟲基因是否轉化成功，可以通過  實驗來實現(xiàn)。
（3）Ti質粒的分子大小有200kb（千堿基對）左右，然而能進入植物細胞的只有一小部分約25kb（稱為T—DNA）。在這一小部分的兩端各有一個25bp（堿基對）長的重復序列LB和RB，這兩個序列對這一小部分DNA進入植物細胞是不可缺少的。實驗證明只要Ti質粒上保留了這兩個序列，即使這兩個序列之間的其它序列被不同程度地改變（如插入一個外源DNA片段），這一小部分也仍然可以轉移并整合到植物的基因組中。
① 在構建的T—DNA過程中，還應該具有和 等結構，才能保證進入植物體的抗蟲基因能夠順利表達。
②Ti質粒不同于其它質粒的最大特點就是它含有T—DNA，如果給你一個不含T—DNA的質粒，你如何把它構建成含有T—DNA的質粒？              。

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