Question

【題目】在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長．如圖為獲得抗蟲棉技術(shù)流程．請據(jù)圖回答：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：目的基因的獲取、、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、 ．
（2）A過程需要的酶有和 ．
（3）要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，首先必須用處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)?/span>態(tài)；然后將在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程．
（4）含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌侵染離體棉花葉片組織后，將離體棉花葉片組織培養(yǎng)成再生植株要經(jīng)過[C]和[E] ． 如要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在C過程的培養(yǎng)基中加入 ．

Answer 1

【答案】
（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建；目的基因的檢測與鑒定
（2）限制酶；DNA連接酶
（3）Ca2+；感受；重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞
（4）脫分化；再分化；卡那霉素
【解析】解：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定．（2）圖中A為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，還需DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組質(zhì)粒．（3）要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，首先必須用Ca2+處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)；然后將重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程．（4）植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化過程，即圖中C表示脫分化過程；D表示愈傷組織，E表示再分化．圖中標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因，因此C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入卡那霉素，以淘汰不含重組質(zhì)粒的細(xì)胞． 所以答案是：（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建 目的基因的檢測與鑒定（2）限制酶 DNA連接酶（3）Ca2+ 感受 重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞（4）脫分化 再分化 卡那霉素
【考點(diǎn)精析】通過靈活運(yùn)用基因工程的原理及技術(shù)，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)即可以解答此題．