Question

【題目】測(cè)定水樣是否符合飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，常用濾膜法測(cè)定大腸桿菌的數(shù)目。濾膜法的大致流程：用濾膜過(guò)濾待測(cè)水樣→水樣中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到含有伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，流程示意圖如下圖所示。其中，指示劑伊紅美藍(lán)可使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)紫黑色。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題：

（1）過(guò)濾待測(cè)水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，其中需要進(jìn)行滅菌處理的是_______________，與過(guò)濾有關(guān)的操作都要在______________旁進(jìn)行。

（2）將完成過(guò)濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上，這屬于微生物培養(yǎng)中的________操作。從物理狀態(tài)角度分析，EMB培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，從功能上分屬于_______培養(yǎng)基。

（3）某生物興趣小組的同學(xué)嘗試按照上述方法進(jìn)行測(cè)定，無(wú)菌操作下將10mL待測(cè)水樣加入到90mL無(wú)菌水中，稀釋后的菌液通過(guò)濾膜法測(cè)得EMB培養(yǎng)基上的菌落數(shù)平均為124，紫黑色菌落數(shù)平均為31，則推測(cè)1L待測(cè)水樣中的大腸桿菌數(shù)目為________。

（4）大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)，用搖床振蕩培養(yǎng)的目的是__________________________。

（5）不同微生物培養(yǎng)的溫度和時(shí)間往往不同，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)，細(xì)菌培養(yǎng)溫度________（填“高于”“低于”或“等于”）霉菌培養(yǎng)溫度，培養(yǎng)時(shí)間則_________（填“長(zhǎng)于”或“短于”）霉菌培養(yǎng)時(shí)間。

Answer 1

【答案】濾杯、濾膜和濾瓶 酒精燈火焰 接種 固體 鑒別 3100 提供氧氣，使大腸桿菌與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸 高于 短于

【解析】

濾膜法是檢測(cè)水樣中大腸細(xì)菌數(shù)量的方法，將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經(jīng)過(guò)抽濾，細(xì)菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后計(jì)數(shù)和鑒定濾膜上生長(zhǎng)的大腸菌的菌落即可推測(cè)計(jì)算出水樣中的大腸桿菌數(shù)；大腸桿菌在伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)后菌落呈深紫色，并有金屬光澤。

（1）過(guò)濾待測(cè)水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，其中需要進(jìn)行滅菌處理的有濾杯、濾膜和濾瓶，與過(guò)濾有關(guān)的操作都要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止雜菌的污染。

（2）將完成過(guò)濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上，可將濾膜上的菌體“復(fù)印”在培養(yǎng)基上，使其在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，這屬于微生物培養(yǎng)中的接種操作。從物理狀態(tài)分析，EMB培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，從功能上分析，由于培養(yǎng)基上加有伊紅美藍(lán)，所以屬于鑒別培養(yǎng)基。

（3）在無(wú)菌操作下將10ml 待測(cè)水樣加入到90ml無(wú)菌水中，即稀釋了10倍，稀釋后的菌液通過(guò)濾膜法測(cè)得EMB培養(yǎng)基上的菌落數(shù)平均為124，黑色菌落數(shù)平均為31，由于黑色菌落為大腸桿菌，所以可推測(cè)1升待測(cè)水樣中的大腸桿菌數(shù)目為31×（1000÷10）=3100個(gè)。

（4）用搖床振蕩培養(yǎng)，可達(dá)到供應(yīng)微生物所需氧氣，同時(shí)使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)與大腸桿菌充分接觸的目的，使大腸桿菌的繁殖速度加快。

（5）不同種類(lèi)的微生物，一般需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)，細(xì)菌培養(yǎng)溫度應(yīng)高于霉菌培養(yǎng)溫度，但培養(yǎng)時(shí)間短于霉菌培養(yǎng)時(shí)間。